黄颡鱼源嗜水气单胞菌的分离鉴定及对三种氟喹诺酮类药物和氟苯尼考的耐药性研究

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1、分类号S窆垒!UDC．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．密级且卜编号——硕士学位论文黄颡鱼源嗜水气单胞菌的分离鉴定及对三种氟喹诺酮类药物和氟苯尼考的耐药性研究温华成学科专业丞亡差殖指导老师黄丝副数援论文答辩日期2Q12生5月2兰目学位授予日期——答辩委员会主席医晓这盟究旦论文评阅人黄焦坚熬援塑太胜直级工程』!垂广西大学学位论文原创性和使用授权说明嘲㈣本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果，

2、也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：口保密，在年解密后适用授权。画不保密。(请在以上相应方框内打“4”)论

3、文作者签名：j辨致指导教师签名：乏约作者联系电话：l弓’]U弓郇甚。日期：≥。队()、zb日期、o＼L、匕、乩电子邮箱：hjl351@163．corn黄颡鱼源嗜水气单胞菌的分离鉴定及对三种氟喹诺酮类药物和氟苯尼考的耐药性研究摘要嗜水气单胞菌是一种能引起鱼类等水产动物败血症、危害性极大、可造成水产养殖业重大经济损失的病原菌。喹诺酮类药物、氟苯尼考因具价格低、广谱高效、副作用小等特点而成为近年来水产常用的治疗药物。但近几年来也看到不少如大肠杆菌、链球菌、杀鲑气单胞菌、嗜水气单胞菌等菌株对氟喹诺类酮药物的耐药性在日益增强的报道。嗜水气单胞

4、菌作为淡水渔业危害极大的病原菌，了解其对三种喹诺酮类药物和氟苯尼考的耐药分子机制，对水产养殖业的可持续发展和科学用药，建立实验室耐药模式菌等均有重大的意义。本试验从广西永福、梧州、桂平3个养殖区域12批次的黄颡鱼病样中共分离鉴定到细菌30株，其中16株为嗜水气单胞菌，占已鉴定菌株总数的53．33％，说明嗜水气单胞菌是黄颡鱼病害中检出率较高的细菌，在这16株嗜水气单胞菌中，有12株为B型溶血，4株不溶血。对这16株嗜水气单胞菌进行了致病性感染试验，结果显示，除了YFl3这株非溶血株无致病性外，其余15菌株均为致病性菌株，但致病菌株间的

5、致病力存在一定差异。K-B纸片法药敏结果显示，15株黄颡鱼源嗜水气单胞菌对19种药物敏感率分别为OXA(6．7％)、AMP(0．O％)、FOR(86．7％)、CEF(46．6％)、ROC(100％)、STR(87．6％)、GEN(100％)、SXT(40．0％)、NEO(93．3％)、SUL(73．3％)、NOV(6。7％)、NOR(100％)、ENR(100％)、LEV(100％)、ENO(60．0％)、OFL(100％)、CEF(80．0％)、FLR(93．3％)、SAR(93．3％)；微量稀释法试验结果：15株菌株除一株对SA

6、Il中介外，其余为敏感，15株菌株对ENR、OFL敏感，所测8株菌对FLR敏感。对3种喹诺酮类药物和氟苯尼考进行耐药性的获得速率试验结果显示，嗜水气单胞菌经3种喹诺酮类药物和氟苯尼考耐药诱导后，均获得很高的耐药性，其中采于梧州、桂平的菌株对SAR耐药率较永福的总体要低，梧州株为256倍，桂平株均低于256倍，永福株获得速率最小为512倍，最大的为2048倍，且大部分永福菌株获得速率均大于512倍；采集于梧州、桂平的菌株对ENR耐药率较永福的总体要低，梧州株低于128倍，桂平株低于512倍，永福株获得耐药率最小为32倍，最大为2048

7、倍，且大部分永福菌株增大512倍；采集于梧州、桂平的菌株对OFL耐药率较永福的总体要低，梧州株低于512倍，桂平株低于512倍，永福株获得耐药率最小为128倍，最大为2048倍，且大部分永福菌株增大1024倍：所测菌株对FLR均获得了稳定的耐药性，但相对喹诺酮类药物增幅普遍不大，获得的速率最大的是GP35，为512倍，最小的是WZ02和GP32，为16倍，此外，耐药突变株还存在对同类药物较高的耐药性，对不同类药物也存在一定的交叉耐药性。耐药突变株耐药性的遗传稳定性试验结果显示，15株菌株除了YF04菌株对ENR、OFL药物的耐药性呈

8、现逐渐减弱的趋势，分别从2099／ml、16099／ml降低为10pg／ml、80}_tg／ml，其余菌株对SAR、ENR、OFL、FLR均保持稳定的耐药遗传性；耐药突变株的保存条件探讨试验结果显示，耐药突变株基本表现出对SAR、EN