鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(b87株)国家参考品的研制

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1、中国兽医药品监察所硕士学位论文鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗（B87株）国家参考品的研制姓名：郭彩云申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：王在时2012-06摘要鸡传染性法氏囊病(Infectiousofbursaldisease，IBD)是由鸡传染性法氏囊病毒(Infectiousofbursaldiseasevirus，IBDV)引起的一种急性、高度传染性疾病。该病毒对雏鸡的淋巴组织尤其是法氏囊有很强的嗜性，通过攻击法氏囊内的B淋巴细胞而导致免疫抑制。因此该疾病的爆发会导致鸡群免疫失败和二次感染，对禽类养殖业危害极大，是家禽传染性疾病中危害最严重的

2、疫病之一。在我国对该病的主要防治措施就是对鸡群进行疫苗免疫，而疫苗质量的好坏直接关乎免疫预防的成败。中等毒力活疫苗(B87株)一直作为国内生产使用最为广泛的鸡传染性法氏囊疫苗，但各厂家的疫苗质量参差不齐，疫苗质量不稳定，效力不均一，导致免疫效果也不一致。因此，急需相应的标准物质来使疫苗效力标准化，控制疫苗的质量，为鸡传染性法氏囊病的防控提供支持。在本研究中，通过对鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(B87株)国家参考品候选物的层层筛选，选定一批后分装冻干，再对其特性值进行协作标定，建立了一套鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(B87株)国家参考品的制备筛选方法，并最

3、终制各得该参考品成品1000支。本研究，建立了检测鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(B87株)国家参考品效力的细胞间接免疫荧光方法，通过判定细胞的半数感染量(1℃ID，o)来确定参考品的效力，并与传统的鸡胚半数致死量(ELD50)进行相关性分析，相关系数r=0．823。本研究中还建立了检测IBDV的荧光定量RT-PCR方法，来测定疫苗中的病毒载量。本研究中采用鸡胚半数致死量(ELD50)方法组织单位对效力值进行协作标定，统计分析处理定值原始数据，将各协作单位分析测定的不确定度引入鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(B87株)国家参考品的定值结果中，得到更准确的、具

4、有置信范围的定值结果。关键词：鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(B87株)，国家参考品，细胞间接免疫荧光，荧光定量RT—PCR，协作标定ABSTRACTInfectiousbursaldisease(IBD)isanactue，highlycontagiousviralinfectionofyoungchickensthathaslymphoidtissueasitsprimarytargetwithaspecialpredilectiomforthebural．Itinducesvaccinationfailureandsecondaryinfections

5、withintheflock，causinghugeeconomiclossestothepoultryindustry,thusIBDVhasbeenconsideredoneofthemostimportantpoultrydiseasesworldwide．VaccineisoneofthemosteffectivemethodsofInfectiousbursaldiseasecontr01inChina，andthequalityofvaccinesisdirectlyrelatedtoimmunesuccessorfailureoftheepid

6、emicdiseaseprevention．ThestrainB87hasbeenthemostwidelyusedasaproductionoftheinfectiousbursalvaccine．Inordertomakesureitsvirulencestabilityandgoodimmuneresponse，weshouldn’tjustdependontherelativewrittenstandards．butalsothephysicalstandards．ThereferencestandardofInfectiousbursaldisea

7、secanbettercontrolthequalityofvaccine，achievingthestandardizationofthecalibrationValHeofeffectiveness．Thenationalstandardmaterialsofinfectiousbursaldiseasewereestablishedthroughtheselection．analysisandthedeterminationofitsstandardfeaturesofsemi—productswhichareservedascandidatestan

8、dardmaterials．Tllisresearc