鸡传染性法氏囊(B87株)抗原液生产工艺探讨.pdf

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1、1..黪基层空问每嚣巍辩掌蓼l§$黪瓣学誊i

2、#l爨嚣在72~96h,期间死亡率42%;Ⅲ组死亡高峰期鸡传染性法氏囊(B87株时间在64~96h,期间死亡率72%;Ⅳ组死亡高抗原液生产工艺探讨峰期时间在58~92h,期间死亡率82%;V组死亡高峰期时间在587-'92h,期间死亡率86%。3.2稀释生产抗原含量及病毒含量测定除I在鸡传染性法氏囊病(B87)组织病毒液的组研磨组织时按3倍稀释外,其余几组全按4倍生产中,规程要求生产种毒的稀释倍数为50~稀释、100倍,而实际中生产种毒效价不是很固定,

3、如4讨论果按此规定稀释种毒,对鸡胚死亡情况及抗原产4.1从照胚结果看来,随病毒接种量的提高,量和效价有无影响无法知晓。本试验将已知效价各组鸡胚高峰期死亡时间有逐渐靠前趋势,高峰的种毒分几个滴度接种一定量的鸡胚,观察其死期死亡率也逐渐增加,Ⅲ、Ⅳ、V组高峰期死亡亡情况,并测定各组抗原的病毒含量,以便取得率较高,在60%以上,且116h后已基本死完;可参考数据。I、Ⅱ组高峰期死亡率值偏低,活胚率亦较高。1材料4.2I组由于病毒接种量小,胚死亡时间较靠1.1鸡胚辽宁益康生物股份有限公司的se,v后,所以

4、在组织捣碎后考虑按3倍稀释,测毒种蛋,并自行孵化至lO日龄。时,效价还是偏低;而整体上效价有逐渐提高趋1.2种毒采用中国兽医药品监察所得鸡传染势,如果各组抗原稀释倍数再扩大,可能差别更性法氏囊病(B87株)冻干毒,并白行繁殖制备生显著一些。产种毒,测定其效价达105.62ELD,dO.24.3鸡胚在死亡高峰期由于日龄较小,所以胎M,一30℃保存备用。儿发育也相对小,因此集中死亡的越早越多,最2方法后所收获的鸡胚组织也就越少,从而会影响抗原2.1接种将种毒用灭菌生理盐水分别稀释为:产量,所以在种毒稀

5、释时,既应考虑鸡胚较好的101.0ELDdo.1mL为I组,1O1.5ELDdO.1mL为死亡率,也应考虑适当后推整体死亡时间,以保Ⅱ组,102.0ELDo/0.1mL为Ⅲ组,102.5ELDJ/证最大的抗原产量。而从本次试验来看,将生产0.1mL为Ⅳ组,103.0ELD50/0.1mL为V组。5个种毒的接种量调整为102.0ELDdO.1mL左右,滴度各尿囊腔接种50枚鸡胚,每胚0.1mL,封可兼顾以上条件,同时也符合规程之规定,降低腊后气室朝上于温度为36.5℃、湿度为65%的孵生产成本,提高

6、经济效益。化机中继续孵化。t4.4生产湿毒在保存期内,应根据保存时间的2.2孵化及收毒弃去接种后24h内的死胚,长短,适当调整稀释倍数,以保证抗原的最大产并孵化至168h。从36h起,每隔6h左右照胚量及合格的效价。(崔立伟,辽中县大黑动监所;1次,及时取出死胚于2~8℃冷却,最后将有特石丽娟,辽中县满都户动监所)征性病变的死胚组织分组收取。2.3病毒的含量测定分别将5组鸡胚组织捣碎,冻融后除去组织残渣,离心保持抗原的纯净,加生理盐水按一定比例稀释,按规程方法测生物安全柜的定病毒含量,计算出各组E

7、LD。。3结果正确使用3.1鸡胚死亡情况Ⅳ、V组鸡胚到、116h已全部死亡,Ⅲ组到140h全部死亡,I、Ⅱ组后期生物安全柜是一种过滤净化通风的负压排风胚相对多一些,I组死亡高峰期时间在72~柜,是为操作具有感染性的微生物实验时,用来l14h,期间死亡率54%;Ⅱ组死亡高峰期时间保护工作人员、实验室环境以及实验样品,使其207306

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