鸡传染性法氏囊病细胞活疫苗的研制

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1、山东农业大学硕士学位论文鸡传染性法氏囊病细胞活疫苗的研制姓名：邵云龙申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：崔言顺;张秀美20040526关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内

2、容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名：——导师签名：——日期：——山东农业大学硕士学位论文鸡传染性法氏囊病细胞活疫苗的研制摘要传染性法氏囊病(mD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的鸡和火鸡的一种急性高度接触性传染病。IBD不但引起鸡群大量死亡，更为重要的是IBDV能够造成鸡法氏囊器官永久性损害，引起免疫抑制，因此对养禽业造成了严重的危害。该病已在全球流行，目前IBD在我国已传遍各地，某些地方发病率高达80％以上，死亡率在30％～70％以

3、上。防制本病的主要方法是疫苗接种。IBD活苗和灭活苗在我国己普遍应用，起到一定作用，但免疫失败现象却普遍存在。原因是多方面的：一方面我国采用的IBDV疫苗株众多，制作和生产单位条件不一；另一方面是用户对疫苗的有关特征了解甚少或使用不当，导致免疫失败；再就是母源抗体的干扰。所以，为了更好地防制IBD，研制一种安全有效的mD疫苗，并制定出其科学的免疫程序和方法是很有必要的。本课题分三部分进行：第一部分：HDS细胞苗(自制法氏囊病细胞活疫苗)的制各。鸡胚成纤维细胞(cEF)制备时，用0．25％胰蛋白酶对鸡胚组织消化20rain为宣。本研究

4、中，在细胞接种病毒时运用的是异步接种法。对不同接毒量的实验表明，每个方瓶(100m1)接毒0．2ml左右病毒原液为宜。接毒后48h出现细胞病变(CPE)，72h病变达70％～85％以上。经病毒蚀斑形成试验检测，病毒滴度达1．0X108PFU／ml。第二部分：自制细胞苗HDS的安全性和有效性实验。用不同免疫剂量免疫雏鸡，确定了最佳免疫剂量为5．O×105PFU／ml，最小免疫剂量为1．0X105PFU／ml。用10倍最佳免疫剂量免疫雏鸡，未见雏鸡出现明显临床症状，证明本疫苗安全。用最佳免疫剂量免疫雏鸡，对强毒攻击的保护率达100％，通

5、过抗体检测，免疫后15dAGP阳转率达100％，免疫后41dELIsA抗体滴度达9000以上，证明本疫苗效果良好。三种疫苗对比试验证明，自制HDS疫苗在保护率和抗体效价方面上均优于以色列疫苗和某国产疫苗。第三部分：IBD母源抗体对疫苗免疫的影响。通过对含母源抗体的雏邵云龙：鸡传染性法氏囊病细胞活疫苗的研制鸡的抗体检测，得出了IBD母源抗体的消长规律。结果得出各组雏鸡在1-4日龄母源抗体逐渐上升，4日龄时达到最高峰，ELISA抗体滴度达4000以上，从7日龄开始下降，7~18日龄则是一个缓慢下降的过程：18～25日龄抗体水平下降速度明

6、显加快，至25日龄降为零。对带IBD母源抗体的雏鸡，我们分别在4、7、10、14、18、21日龄接种HDS细胞苗，实验结果证明在14日龄接种疫苗，雏鸡产生的抗体滴度能达到较理想的水平。关键词：IBDV细胞苗抗体效价免疫程序母源抗体山东农业大学硕士学位论文StudyonvaccineproducedbyCEFtodefendinfectiousbursaldiseaseShaoYunlong(ColleageofAnimalSci．&Tech．，ShandongAgri．Univ．，Tai’an，China,271018)Abstra

7、ctInfectiousbursaldisease(IBD)isahightangentinfectiousdiseasecausedbyinfectiousbursaldiseasevirus(mDV)．Chickenandturkeycanbeinfectedbyit．Manyinfectedchickendieofit．Themostimportant,apermanentharmtobursalofinfectedchickencanbecausedbyit．Thiswillleadtoimmunosupression．An

8、dimmunosupressionisaseriousharmtochicken．Atpresentthereisinfectiousbursaldiseaseinmanyplaces．Boththeinfectionrateandt