苦参碱对人横纹肌肉瘤rd细胞增殖、凋亡及cyclin d1、survivin表达的影响

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1、徐州医学院硕士学位论文苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖、凋亡及CyclinD1、Survivin表达的影响姓名：郭雷申请学位级别：硕士专业：儿科学指导教师：薛天阳2012-03徐州医学院硕士学位论文苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖、凋亡及CyclinD1、Survivin表达的影响中文摘要目的观察苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞的增殖抑制及促凋亡作用；探讨CyclinDl、Survivin基因在增殖、凋亡过程中的作用机制。方法采用体外细胞培养技术，应用不同浓度苦参碱(0，O．5，1．0，1．5，2．Omg／m1)分别作用人

2、横纹肌肉瘤RD细胞株48h。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度苦参碱对RD细胞的增殖抑制率；流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率及细胞周期的分布；RT-PCR法检测CyclinDl及SurvivinmIⅢA的表达。结果MTT检测对照组与实验组增殖抑制率分别为(12．70±3．48)％、(31．16±6．43)％、(42．96±7．50)％、(57．26±8．02)％、(67．69±6．11)％；流式细胞仪检测对照组与实验组凋亡率分别为(3．33±0．29)％、(15．51±5．03)％、f26．17±4．07

3、)％、(35．20±4．82)％、(46．09±4．06)％；以上检测实验组与对照组相比差异有统计学意义(P锄．DJ)，各浓度组问比较差异有统计学意义(P

4、，与对照组比较差异均有统计学意义(尸锄．D-)。其中cyclinDl各浓度组间比较差异有统计学意义妒锄．∞)，而Survivin仅0．5mg／m1与1．5mg／ml组．间比较差异有统计学意义(P<∞．(U)。结论苦参碱能明显抑制横纹肌肉瘤RD细胞的增殖，使细胞周期阻滞于GO／G1期，诱导其凋亡；其抗肿瘤机制可能与下调Survivin和CyclinDlmRNA的．堡型堕堂堕堡主堂篁笙壅．—————————————————————————一—————————————————————————一表达有关。关键词苦参碱；横纹肌肉

5、瘤；细胞凋亡；CyclinDl；SurviVin徐州医学院硕士学位论文～—●————————————————-————————●———_————————-———————●—————————————————————_————————————__——————-————一一El№ctsofMatrineOnProliferation／ApoptosisandCyclinD1／SurViVinExpressionofHumanRhabdomyosarcomaRDCellsAbstractobjectiVeToinVestiga

6、tethere矗ainr01eofproliferationandap叩tosisonRDcellsactedbyMatrine；TofindoutmeroleofCyclinDl／SurviVingeneintheprocessofpr01if．eratioI】andapoptosis．MethodsThehumanr11abdomyosarcomaRDcells1inewastreatedwithmatrineofdiH、erent(：oncentrations(0，0．5，1．O，1．5，2．0m∥m1)for4

7、8hoursrespectiVely；Thepr01iferationinhibitionratesofdif衔entconcentrationsofmatrineonRDcellswereeValuatedbyMTTassay；Cellsapoptosisratesanddistributionsofcellcyclewereex锄inedby’nowcytomet巧(FCM)；ExpressionsofCyclinD1／SurviVinmRNAweremeasuredwithImPCR．ResultsProlife

8、rationi1111ibitionratesbetweencontrol铲oupandexpe订mental伊oupcellswere(12．70±3．48)％，(31．16±6．43)％，(42．96±7．50)％，(57．26±8．02)％，(67．69±6．11)％respectiVely；Theapoptosisrate