苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制.pdf

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1、史华实用儿科临床杂志2015年2月第30卷第3期ChinJApplClinPediatr，Febmary2015。Vo1．30，No．3·233·实验研究·苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制玄承敏薛天阳许伟【摘要】目的观察苦参碱对体外人横纹肌肉瘤([tMS)RD细胞株增殖和凋亡的影响，研究苦参碱对人RMSRD细胞株中p—catenin与原癌基因Bcl-2及凋亡基因Caspase-3的影响及其表达关系，探索Wnt／13一catenin通路在RMS发生过程中的作用机制。方法应用不同质量浓度苦参碱(0．5、1．0、1．5、2．0g／L)分别作用人RMSRD细胞株48

2、h；采用四甲基偶氮唑蓝(MTF)比色法检测不同水平苦参碱对RD细胞的增殖抑制率；流式细胞仪检测细胞凋亡率；Westernblot法检测p．catenin、Bcl-2及Caspase-3蛋白的表达。结果MTY检测对照组及各实验组增殖抑制率分别为(13．70±0．25)％、(33．16±0．11)％、(42．96±0．90)％、(56．26±0．79)％和(67．89±0．63)％；流式细胞仪检测对照组及各实验组凋亡率分别为(5．494-0．96)％、(17．23±5．03)％、(25．84±4．17)％、(36．08±3．68)％、(47．79±4．82)％；Westernblot结

3、果显示对照组B—catenin和Bc1．2蛋白表达最高，而Caspase一3表达量最低，各浓度组B—catenin和Bcl-2的表达明显降低，而Caspase一3的表达明显增高，且表现明显的质量浓度依赖性。以上检测各浓度组与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0．05)。结论苦参碱能明显抑制RMSRD细胞的增殖，并诱导其凋亡；苦参碱可下调Wnt／13．catenin通路中关键分子B—catenin的表达，降低Bcl-2的表达，上调Caspase一3表达；Wnt／13一catenin信号通路在苦参碱诱导的RD细胞凋亡过程中发挥重要作用，其下游调控蛋白Bcl-2及Caspase一3共同

4、参与了这一过程的调控。【关键词】苦参碱；横纹肌肉瘤；wnt相关蛋白；细胞凋亡EfectsandmechanismsofmatrineonproliferationandapoptosisofhumanrhabdomyosarcomaRDcellslineXuanChengmin，XueTianyang，XuWei．DepartmentofHematology，XuzhouChildrensHospital，Xuzhou221002，JiangsuProvince，ChinaCorrespondingauthor：XueTianyang，Email：xuety2006@163．con

5、【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsofmatrineonproliferationandapoptosisofhumanrhabdom—yosarcoma(RMS)RDcellslinevitro，tostudytheregulatorymechanismofWnt／13一cateninpathway—influencedapoptosisofRDcellslinebydetectingtheexpressionsofB—cateninprotein，Bcl一2proteinandcaspase一3protein，andtoexpl

6、oreWnt／13一cateninmechanismduringtheprocessofRMS．MethodsThehumanRMSRDcellslinewastreatedwithmatrineofdifferentconcentrations(0．5，1．0，1．5，2．0g／L)for48hoursrespectively，andtheproliferationinhibitionratesofdifferentconcentrationsofmatrineonRDcellsweredetectedbymethylthiazolyltetrazoliumassay，while

7、theapoptosisratesbyflowcytometry(FCM)andtheexpressionsofB—catenin，Bcl一2andcaspase一3byWes—ternblot．ResultsTheproliferationinhibitionratesbetweencontrolgroupanddifferentconcentrationsofmatrinegroupswere(13．70±0．25)％，(33．16±0．11)％，(42．96±0