胎盘tlr3、nf-κb与hbv宫内感染的相关研究

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1、泰山医学院硕士学位论文胎盘TLR3、NF--κB与HBV宫内感染的相关研究姓名：梁雷申请学位级别：硕士专业：妇产科学指导教师：司红卫2012-04胎盘TLR3、NF—KB与HBv宫内感染的相关研究研究生：梁雷专业：妇产科学导师：司红卫教授中文摘要目的1．了解HBsAg阳性孕妇胎盘组织HBV感染和HBV宫内感染情况；2．了解Toll样受体3(TLR3)、核转录因子(NF—KBp65)在正常孕妇、HBsAg阳性孕妇足月胎盘组织中的基因表达水平和蛋白分布情况；3．了解TLR3、NF，KBP65与孕妇HBV感染及HBV宫内感染的关系；4．初步探讨TLR3、NF．KBp65、IFN．p在胎

2、盘抵御HBV感染及HBV宫内感染中的作用。方法选择2010年7月至2011年11月在泰安市中心医院产科进行产检并且分娩的外周血HBsAg阳性孕妇68例为研究组，同期选择于本院产科进行产检并分娩的正常孕妇30例为正常对照组，两组孕妇肝功能正常。根据孕妇知情同意原则，在孕妇分娩前采集肘静脉血，分娩时采集脐血，同时无菌收集分娩时胎盘组织，进行下述研究：1．采用双抗体夹心酶链免疫吸附法(ELISA)检测母血和脐血中HBsAg、HBeAg及母血中IFN．p，荧光定量PCR法检测HBVDNA含量；2．采用免疫组化法检测HBsAg阳性孕妇胎盘组织中HBsAg的分布及正常孕妇和HBsAg阳性孕妇

3、胎盘TLR3、NF一1(Bp65的蛋白分布及表达情况；3．采用RT．PcR检测正常孕妇和HBsAg阳性孕妇胎盘TLR3mRNA、NF—KBp65mRNA的表达情况。结果1．68例HBsAg阳性孕妇所生新生儿，11例脐血中HBsAg阳性，16例HBVDNA阳性，任意一项阳性者20例，即宫内感染组20例，宫内未感染组48例，合计宫内感染率29．41％(20／68)，母亲HBsAg、HBeAg双阳性者共38例，其宫内感染率36．84％(14／38)；2．母血HBVDNA阳性与HBVDNA阴性进行宫内感染率比较，差异有统计学意义(z2=24．178，尸<0．001)；3．免疫组化检测68

4、例HBsAg阳性孕妇足月分娩胎盘组织HBsAg，其中33例阳性，阳性率为48．53％(33／68)。蜕膜细胞(DC)感染率为48．53％(33／68)，滋养层细胞(TC)感染率为42．65％(29／68)，绒毛间质细胞(VMC)感染率为30．88％(21／68)，绒毛毛细血管内皮细胞(VCEC)感染率为13．24％(9／68)，在胎盘各型细胞中HBsAg的表达差异有统计学意义，行×列表卡方检验如?=26．314，尸

5、30例正常孕妇的胎盘组织中均有TLR3蛋白的表达，且TLR3蛋白在胎盘的各型细胞中均有表达，68例HBsAg阳性孕妇中56例胎盘组织中有TLR3表达，阳性率为82．35％(56／68)，TLR3在正常孕妇胎盘各型细胞及HBsAg阳性孕妇胎盘组织各型细胞中分布差异均有统计学意义(DC：z2=31．099，尸<0．001，TC：z?=21．950，尸<0．001，VMC：z?=11．086，尸<0．001，VCEC：z2=9．728，尸<0．001)，HBV宫内感染组TLR3的阳性率明显低于宫内未感染组，差异有统计学意义，仅2=11．848，P<0．001)，所有HBsAg阳性组和正

6、常对照组胎盘组织中均检测到NF．KBp65蛋白的表达，NF．KBp65主要表达于胎盘组织滋养细胞、血管内皮细胞浆及少量胞核中；5．HBsAg阳性组胎盘组织中TLR3、NF．KBp65蛋白染色的平均光密度值均较正常对照组明显减弱，差异有统计学意义(尸<0．05，尸O．05)，HBV宫内感染组和HBV宫内未感染组的NF—KBp65蛋白的平均光密度值明显低于正常对照组，差异有统计学意义，(尸<

7、0．001，P