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时间:2019-02-22
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1、....水泡性口炎病毒在草鱼肾细胞中的复制和病变效应摘要:目的观察水泡性口炎病毒(Vesicularstomatitisvirus,VSV)感染草鱼肾细胞(CIK细胞)所引起细胞病变效应并检测其在细胞中的复制。方法用VSV病毒印第安纳(VSVIndiana)株感染CIK细胞,分别在12h、24h、36h观察病变效应。当出现大范围的细胞病变时,提取病毒RNA,通过RT-PCR方法检测病毒在细胞中的复制。结果受VSV病毒感染后的CIK细胞圆缩、聚集、脱落,形成包涵体,随着时间的延长该现象逐渐加剧。RT-PCR结果显示出现了预期的200bp左右的条带。结论VSV病毒引起了CIK细胞的病变,
2、并在CIK细胞中进行了复制。关键词:VSV病毒,CIK细胞,病变效应,复制VesicularStomatitisVirusinCtenopharyngodonIdellusKidneyCellsReplicationandCytopathicEffect06092204GAOXia-Ting(QiuzhenSchoolofHuzhouTeachersCollege,Huzhou313000)Abstract:ObjectiveWeobservedcytopathiceffectinCtenopharyngodonidelluskidneycells(CIKcells)inducedb
3、yVesicularstomatitisvirus(VSV)anddetectedVSV’sreplicationinit.MethodsCIKcellswereinfectedbyVSVIndianastrains.After12h,24h,36h,thecellcytopathiceffectwasobserved.Whenawiderangeofcytopathiceffectappeared,thevirus’sRNAwouldbeextractedanddetectedbyRT-PCR.ResultsCIKcellswithVSVbecameroundshrinkage,g
4、ottogether,shaded,andformedinclusionbody.Withtheextensionoftime,itincreased.RT-PCRresultshowedthattheexpectedbandsof200bpwereamplifiedwithtemplatesofvirus’sRNA.ConclusionCytopathiceffectappearedinCIKcellswithVSV.AndVSVcouldreproduceinCIKcells.Keywords:VSV,CIKcells,cytopathiceffect,replication..
5、.目录1引言………………………………………………………………………………………12实验材料和方法…………………………………………………………………………22.1材料…………………………………………………………………………………22.1.1实验细胞2.1.2主要化学药品和试剂2.1.3主要仪器与设备2.1.4试剂配制2.2方法与步骤…………………………………………………………………………42.2.1草鱼的肾细胞(CIK细胞)培养2.2.2VSV病毒的复壮与效价检测2.2.3细胞病变效应2.2.4病毒RNA提取及RT-PCR测定草鱼肾细胞(CIK细胞)中VSV的复制2.2.5空斑实验3结
6、果与分析………………………………………………………………………………103.1正常草鱼的肾细胞(CIK细胞)培养特征…………………………………………113.2水泡性口炎病毒(VSV病毒)的复壮……………………………………………113.3VSV病毒感染草鱼肾细胞(CIK细胞)不同时间后产生的细胞病变效应……113.4RT-PCR检测VSV病毒在CIK细胞中的复制…………………………………123.5空斑试验……………………………………………………………………………134讨论………………………………………………………………………………………134.1VSV病毒对不同细胞系引起病变效应………
7、……………………………………134.2VSV病毒对Vero细胞、3T3细胞、CIK细胞的空斑实验结果的比较…………144.3VSV病毒的检测方法………………………………………………………………155总结与展望………………………………………………………………………………15参考文献………………………………………………………………………………16致谢………………………………………………………………………………17...1.引言VSV病毒为弹状病毒科(Rhabd
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