姜黄素通过tgf-βsmad和tgf-βerk途径对乳腺癌mda-mb-231细胞mmp-9以及侵袭能力的影响

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时间:2019-02-22

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1、重庆医科大学硕士学位论文姜黄素通过TGF--β/Smad和TGF--β/ERK途径对乳腺癌MDA--MB--231细胞MMP--9以及侵袭能力的影响姓名:磨娜申请学位级别:硕士专业:病理学与病理生理学指导教师:曹友德201205重庆医jpl大学硕士研究生学位论文姜黄素通过TGF.B/Smad和TGF.B/El淑途径对乳腺癌MDA.MB.231细胞MMP.9以及侵袭能力的影响摘要目的:通过研究姜黄素对转化生长因子一13(Transfo眦ing铲owthfactor-p,TGF—p1)诱导的乳腺癌MDA.MB一231细胞内基质金属蛋白酶.9(Matrixmetallopepti

2、dase.9,MMP.9)表达以及侵袭能力的影响,探讨TGF.p/Smad和(或)TGF—p/MAPKs信号通路在姜黄素抑制TGF—p1诱导的乳腺癌侵袭转移中可能存在的作用机制。方法:1.cCK.8法检测姜黄素对乳腺癌MDA.MB.23l细胞的细胞毒性作用。2.侵袭小室观察姜黄素对TGF一6l诱导的乳腺癌MDA—MB一231细胞内的侵袭能力的影响。3.Westemblot检测姜黄素对TGF—p1诱导的MDA.MB-23l细胞内MMP一9的蛋白表达以及上游Smad2、ERKl/2、p38的磷酸化水平。4.明胶酶谱法检测姜黄素对TGF—p1诱导的MDA·MB-231细胞上清液中

3、MMP一9的活性变化。5.Westemblot和酶谱法检测姜黄素,ERK特异性抑制剂PD98059,p38特异性抑制剂SB203580对TGF—pl诱导的MDA—MB一23l细胞MMP一9蛋白表达及活性变化。结果:1.CCK一8结果证实低浓度(≤10pM)姜黄素作用48h内,对’重庆医科大学硕士研究生学位论文乳腺癌MDA.MB.231细胞没有明显的细胞毒性作用(P>O.05);浓度大于lO删的姜黄素呈剂量,时间依赖性抑制细胞的生长(P

4、ot显示姜黄素(≤10州)可显著抑制TGF-p1诱导的MDA.MB一23l细胞MMP一9,p—Smad2,p-ERKl/2以及p-p38的蛋白表达,其抑制作用呈浓度,时间依赖性。4.明胶酶谱法结果表明姜黄素(≤lO州)随浓度增加对TGF—pl诱导的MMP一9活性的抑制作用显著增强(P0.05)。结论:姜黄素可能通过TGF—13/Smad,TGF—13/ERK信号通路降低TGF—Dl诱

5、导的MMP.9表达及其活性,从而抑制MDA—MB.23l细胞侵袭性。关键词姜黄素;乳腺癌;TGF—p1;MMP一9;MAPK;侵袭重庆医科大学硕士研究生掌位论文Theefl.ectofCurcuminonMMP一9andinVasionabilityViainhibitingTGF·p/Smad,TGF—p/ERKsignalinginhumanbreastcancerM回A—MB一231ceUsABSTRACTObjective:Toevaluatethee能ctofCurcum血onthee冲ressionofMMP一9a11dinVasionabili够induced

6、byTGF—p1.Andto缸t11erinVestigatethepossiblemechanismofCurcumiIlonthepreVentionofTGF.p1.regulatedinvasionandnligrationt11roughTGF—p/Smadand/orTGF-p/MAPKssigllalinginhullanbreastcancerMDA—MB一231cells.Method:1.TheceUto妇c时ofcurcuminonMDA-MB-23lcellswasmeasuredwithCCK一8assay.2.1、ranswellchamberc

7、heckedinvasionofMDA-MB一231cellsw-llichtreatedwith10ng/ⅡdTGF—plaIId/orCurcu“n(S1O心I)3.Ther01eofCurcuminonTGF-pl—stinmlatedproteineXpressionofMMP.9andSmad2,ERK1/2,p38phospho巧lationwereexamiIledbywestemblot4.TheconditionedmediawerecollectedtoanalyzetheactiVityofM

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