pegfpn1-dnegfr对胃癌细胞的化疗增敏作用及其机制的实验研究

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1、重庆医科大学硕士学位论文pEGFPN1--dnEGFR对胃癌细胞的化疗增敏作用及其机制的实验研究姓名：杨宁波申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：王子卫201205重庆医科大学硕士研究生学位论文pEGFPNl-dnEGFR对胃癌细胞的化疗增敏作用摘要目的：研究人EGFR显性负性突变体真核表达载体(pEGFPNl-dnEGFR)对人胃癌细胞株SGC．790l和NCI．N87化疗敏感性的影响，并探讨其可能机制。方法：MTT法测定奥沙利铂对稳定转染pEGFPNl．dIlEGFR和pEGFP-N1载体的两种胃癌细胞的量效反应。奥沙利铂作用各组

2、细胞24h后，RT-PCR检测各组细胞中Caspase．3和CyclinDl的mRNA表达情况；W-estemblot检测各组细胞中Caspase-3和CyclinDl蛋白表达情况。结果：转染pEGFPNl一dnEGFR后，两种胃癌细胞对奥沙利铂的敏感性增加，奥沙利铂对pEGFPNl．d血GFR转染组细胞的增殖抑制率与对照组相比有显著提高(P

3、显示pEGFPNl．(岫GFR转染组细胞CyclinD1蛋白表达较对照组下降，而Caspase．3蛋白表达较对照组升高(火O．05)。结论：EGFR显性负性突变体能提高胃癌细胞对化疗药物奥沙利铂的敏感性，其机制可能与Caspase一3和CyclmD1有关。关键词：胃癌；pEGFPNl-d11EGFR；奥沙利铂；Caspase．3；Cycl逾D1；化疗敏感性’EFFECTSoFPEGFPNl．DNEGFRoNCHEMoSENSITⅣITYTooXALIPLA『TINoFGASTRICCARCINoMACELLSABSTRACTObject

4、iVes：Tbi11VestigatemeefrectsofpEGFPNl．dr匹GFRonChemosensitiVityofhumangastriccarcinomacelllillesSGC．7901andNCI-N87tooxaliplatill，andtoelucidateⅡlepotentialmechanism．M：ethods：OxaliplatiIlindi毹rentconcen仃ationswereaddedtoeach铲oup，medose—e能ctresponsewasexamiIledbyMTTassay．，n

5、le耐ⅢAexpressionofCaspase-3andCyclmD1weredetectedbyreversetranscriptionPCR(ImPCR)ineach目．oupat24haRerincubatedwithoxaliplaCill．ProteinexpressionofCaspase-3andCyclinD1weredetectedbyW．estemblot．Results：pEGFPN1-dI也GFRcouldiIlcreasethesensitivitytooxaliplatiIliIlboth船ohumanga

6、s仃iccarciIlomaceUlilles．ThevalueofinhibitionfVI)ofoxaliplatiningroupsaddedwithpEGFPN1．(1nEGFRandoxaliplatinweresignificantlyhigherthanthosei11othergroups俨≮O．05)．Rrr-PCRresultsshowedthatm王斟AexpressionofCyclillD1wasdecreasedi11cellstranfectedwithpEGFPNl-dnEGFR(尸

7、ntrast，Caspase_3mRNAwasincreasedi11cells协cubatedwithoxaliplatillfor24h．3重庆医科大学硕士研究生学位论文W．estemblotresultsshowedthattranfectionwimpEGFPNl-dnEGFR1eadtoadecreaseofCyclinD1proteiIlexpression，andanincreaseofCaspase一3proteillexpressionaRer48hi11cubatedwithoxaliplatin(P

8、onclusion：pEGFPN1-dnEGFRcanenhancethechemosensitivitytooxaliplatin证hlImangastriccarcillomacells，whichma