oct4在es来源神经前体细胞向神经元分化中的作用研究

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1、Oct4在ES来源神经前体细胞向神经元分化中的作用研究计：学位论文：44页表格：1个插图：8幅申仑指导教师：张波教授申请学位级别：硕士学位论文提交日期：2012年4月学位授予单位：大连医科大学专业名称：外科学论文答辩日期：2012年5月学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明

2、确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：空垒签字日期：苎生年互月止日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3／、1￡一—j一(一)IUU舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(五)结论⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯440ct4在ES来源神经前体细胞向神经元分化中的作用研究硕士生姓名：指导教师：专业名称：申仑张波教授外科学摘要目的：应用慢病毒RNA干扰方法抑制ES来源神经前体细胞Oct4基因表达，以

4、观察OcN基因在ES来源神经前体细胞向神经元分化中的作用。方法：首先利用293T细胞包装Oct4干扰慢病毒，再次用“五步法”诱导小鼠胚胎干细胞向神经元分化，进入扩增期后给予OcN干扰RNA，采用ReN．timePCR方法检测干扰后细胞Oct4表达情况，最后进行分化计数，免疫组化鉴定分化后的细胞，计数分化后的新生神经元比例。结果：本实验中Oct4干扰慢病毒可以有效的转入ES来源神经前体细胞，使OcN表达下降约40％，诱导分化后正常组细胞分化出神经元约75．5士5．2％，GFP组分化出神经元约73．8士4．7％，Oct4干扰RNA组生成神经元约33．8士2．9％。由SPSSl0．0软件进

5、行统计学分析可得，空白对照组与GFP组相比，P>0．05，无统计学意义；空白对照组与OcN干扰组相比，P<0．01，有显著的统计学意义：GFP组与Oct4干扰组相比，P<0．01，有显著的统计学意义。结论：利用慢病毒可以将OcNsiRNA有效的转入神经前体细胞中，使ES来源神经前体细胞Oct4表达显著降低。证实了在ES来源神经前体细胞中依然表达着Oct4基冈，Oct4基因不仅是维持干细胞全能性的重要因子，它对于ES来源向神经前体细胞向神经元分化也是必不可少的。关键词：胚胎干细胞慢病毒OcNRNA干扰诱导分化ThefunctionofOct4inDifferentiationofEmb

6、ryonicneuralprecursorcellstoneuronsMasterdegreecandidate：ShenLunSupervisor：ProfessorZhangBoMajor：surgeryAbstractObjective：UselentiviralRNAinterferencemethodtoinhibitOct4geneexpressioninneuralprecursorcellsderivedfromES，inordertoobservethefunctionofOct4geneindifferentiationofEmbryonicneuralprecu

7、rsorcellstoneuronsinvitro．Method：Firstuseof293TcelltogetOct4interferenceRNAinterferencelentivirusslowvirus，Second，use”fivesteps”methodinducemouseembryonicstemcellsdifferentiatetoneuralprecursor，thengiveOct4interferenceRNAlentiviru