mdr ab氨基糖苷类耐药机制及中草药抑菌探索

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1、南昌大学硕士学位论文MDRAB氨基糖苷类耐药机制及中草药抑菌探索姓名：刘晓庆申请学位级别：硕士专业：病原生物学指导教师：李蓉201205摘要目的：1．探讨鲍曼不动杆菌(AcinetobacterbaumanniLAB)对氨基糖苷类抗生素的耐药性及其耐药机制。2．以20种中草药醇提液为研究对象对11种临床常见MDR细菌，通过观察体外抗菌活性探索中草药用于控制MDR细菌的可行性及其可能机制。方法：1．对71株MDR-AB用VITEK分析仪进行药敏分析：2．通过PCR探索质粒上的相关耐药基因(aacCl、aacC2、aacC3、aacA4,aadAl、aadA2、aacA7、armAl和ar

2、mA2)；3．对所获得的耐药基因测序，寻找可能的基因突变位点；4．鲍曼不动杆菌有效抑菌中草药筛选；5．用VITEK分析仪进行临床常见MDR细菌的鉴定及抗生素药敏分析；6．中草药的抑MDR细菌实验及其MIC测定。结果：1．71株AB对庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星的耐药率分别为100％(71／71)、73％(52／71)和20％(14／71)，其中20％对3种氨基糖苷类抗生素全耐药；2．aaaCl、aacA4、armAl、aadAl和armA2基因阳性率分别为100％(71／71)、100％(71／71)、84．5％(60／71)、98．6％(70／71)411100％(71／71)，aa

3、cC2、aacC3、aadA2、aacA7均为阴性。3．五倍子、黄连乙醇提取物对11种临床常见MDR菌有较强的抑菌活性，其抑菌圈均大于氨苄西林、庆大霉素和链霉素；4．五倍子和黄连的MIC分别低达0．195rag／mE和6．25rag／mE，且其相应浓度均能有效抑制ICU气传细菌的生长。结论：1．质粒上广泛携带氨基糖苷类修饰酶基因aacCl、aacA4、aadAl和甲基化酶基因armAl、armA2可能是AB多重耐药的主要机制之一；2．五倍子乙醇提取物的抑菌谱广，甚至对临床常见MDR菌均有明显的抑菌效摘要果，可为临床MDR菌感染提供新的治疗参考；3．五倍子提取物在一定程度上可抑制空气中传

4、播的细菌生长，可考虑应用于空气消毒剂的制备研究。关键词：鲍曼不动杆菌；氨基糖苷类；中草药；抑菌圈；最低抑菌浓度IIIAbstractObjeetive：ABSTRACT1．ExploreonthedrugresistanceanditsmechanismofAcinetobacterbaumannii(4B)toaminoglycosideantibiotics．2．Analyzeeffectsofethanol-extractsof20commonherbsto1kindsofmultipledrug。resistantbacteriawhicharecommoninClinic．E

5、xplorethefeasibilityofChineseherbsforbacteriostasisanditspossiblemechanismsbyobservingantibacterialactivityinvitro．Methods：1．Analysisdrugsensitivityof71MDRacinetobacterbaumanniibyVITEK；2．Studytheplasmidrelateddrugresistancegenes(aacCl，aacC2，aacC3，aacA4，aadA1，aadA2，aacA7larmA1andarmA2)bywayofpoly

6、merasechainreaction(PCR)；3．Findoutpossiblegenemutationsthroughsequencing；4．ScreenforChineseherbswhichhavegoodeffectonAB：5．IdentifyofclinicalcommonMDRbacteriaandtheirdrugsensitivitybyVITEK；6．DetectaffectsofherbsonMDRbacteriaandtheirMIC．Results：1．DrugresistantratesofABtoGentamycin，TobramycinandAmi

7、kacinwere100％(71／71)、73％(52／71)and20％(14／71)respectively，20％ofthemshowresistancetoallthesethreekindsofaminoglycosideantibiotics；2．ThepositiverateofgenotypeaaaCl、aacA4、armA、aadAlandarmA2were100％(71／71)，100％(71／71)，84．5％(60／71