针刺对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞camkⅱ信号传递作用的影响

《针刺对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞camkⅱ信号传递作用的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中图分类号论文编号学科分类号密级ShanxiUniversityofChineseMedicine硕士学位论文针刺对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞CaMKⅡ信号传递作用的影响EffectofacupunctureonCaMKIIsignaltransmissioninischemiareperfusioninjuryofratmyocardialcell研究生姓名：张斌仁导师姓名、职称：田岳凤教授学科、专业名称：针灸推拿学研究方向：针刺效应的基础与临床应用研究申请学位类型：科学学位二O一二年六月二十日山西中医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工

2、作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：年月日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山西中医学院有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权山西中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名：论文导师签名：年月日中文摘要急

3、性心肌梗死病情危重，早期再灌注是挽救缺血濒危心肌的必要条件。然而，大量动物实验和临床观察发现，在成功恢复心脏血流后，部分心肌不仅未能得到恢复，反而出现功能、结构、代谢上的损伤，最终导致心肌细胞坏死、凋亡和心力衰2+竭，造成心肌的缺血再灌注损伤。缺血、缺氧导致能量代谢障碍是细胞内Ca增高2+的重要原因，晚期心肌细胞膜和肌浆网膜通透性改变，使细胞发生Ca超载并引发了不可逆损伤。钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）是细胞内钙的重要生理靶位，是参与调节2+细胞内钙稳态的关键酶，CaMKⅡ活性的变化导致Ca稳态平衡失调及细胞凋亡的发生。本研究在以往研究的基础上，观察了针刺手厥阴经穴对大鼠缺血再灌注损伤心肌

4、细胞CaMKⅡ蛋白含量、CaMKⅡmRNA表达水平及心肌细胞凋亡等的影响，探讨针刺对CaMKⅡ信号通路作用机制，为今后临床研究提供理论依据。目的：本研究以大鼠心电图为基础，观察电针手厥阴经“内关”、“郄门”穴在缺血再灌注损伤过程中对大鼠血清hs-CRP、心肌组织内CaMKⅡ蛋白含量、CaMKⅡmRNA表达水平及心肌细胞凋亡的影响，阐明针刺的作用、CaMKⅡ与心肌细胞凋亡间的关系。方法：Wistar大鼠70只，随机分为假手术组、缺血-再灌注模型Ⅰ组、缺血-再灌注模型Ⅱ组、针刺“内关”治疗组、针刺“郄门”治疗组、针刺“合谷”对照组和CaMKⅡ抑制剂组。假手术组只穿线不结扎冠状动脉，CaMKⅡ抑制剂

5、组在造模前尾静脉注射CaMKⅡ抑制剂KN-93(1μmol/L)（0.075ml/10g），其余各组制备缺血-再灌注模型，其中3个针刺穴位组分别为电针大鼠“内关”穴、“郄门”穴和“合谷”穴20min，结扎冠状动脉左前降支40min，心电图监测，而后再次电针上述穴位20min，松扎，恢复冠脉灌流。假手术组于穿线后100min、模型组和各针刺穴位组于再灌注后60min，腹腔静脉取血并摘取心脏，观察心电图ST段的变化情况及血清hs-CRP的含量；荧光免疫组化法观察CaMKⅡ蛋白的表达；实时荧光定量（RTFQ）PCR法分析CaMKⅡmRNA的表达率；TUNEL法观察心肌细胞凋亡率。全部数据用SAS8.

6、2统计软件由专业人员进行分析。结果：1．心电图监测结果分析，与模型Ⅰ组比较，模型Ⅱ组、“合谷”组STⅡ值均无明显差异（P＞0.05），“内关”组、“郄门”组和CaMKⅡ抑制剂组有显著差I异（P＜0.01）；“郄门”组和CaMKⅡ抑制剂组STⅡ值变化与“内关”组无明显差异（P＞0.05）。2．与假手术组比较模型组和针刺“合谷”组血清hs-CRP含量均明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01），与模型Ⅰ组比较，模型Ⅱ组、针刺“合谷”组均无明显差异（P＞0.05），针刺“内关”组、针刺“郄门”组和CaMKⅡ抑制剂组血清hs-CRP含量有显著差异（P＜0.01）；“内关”组血清hs-CRP含量要明显低

7、于模型组和对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。3．CaMKⅡ平均光密度值检测显示，与假手术组比较，其余各组均有不同程度的升高，其中以模型组最高，差异非常显著（P＜0.01）。模型组与“合谷”组CaMKⅡ平均光密度值无明显差异（P＞0.05），但与“内关”组、“郄门”组和CaMKⅡ抑制剂组差异明显（P＜0.01）；“内关”组CaMKⅡ平均光密度值高于假手术组而低于模型组，差异有统计学意义（P＜