灯盏细辛对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响

《灯盏细辛对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、硕士学位论文灯盏细辛对大鼠肺缺血-再灌注损伤的影响TheEffectsofErigeronbreviscapineonIschemiaReperfusionInjuryofRatLung专业名称：胸心外科研究生：陈柏梁导师：段明科教授汕头大学医学院汕头大学医学院第二附属医院2007年5月广东汕头汕头大学医学院硕士学位论文中文摘要背景及目的：肺缺血-再灌注损伤(lungischemiareperfusioninjury,LIRI)在体外循环下心脏手术、肺移植、肺栓塞及休克等多种临床情况下均可发生；尤其是肺移植过程中，严重者可以引起急性呼吸窘迫综合症、多器官功能障碍。迄今为止，LIRI仍是

2、胸心外科医生面临的严峻挑战。肺移植后缺血-再灌注导致的移植肺损伤有较高的发病率和致死率，故更好的研究LIRI的发生机制，寻找更有效的措施以减轻再灌注损伤，对临床实践有重要意义。本实验通过建立大鼠原位肺缺血-再灌注损伤模型，检测各组肺湿干重比（wet/dry,W/D），肺组织髓质过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）活性，以及肺细胞核内核转录因子-κB（nuclearfactor-κB，NF-κB）活性及含量，光镜下HE染色观察病理形态学改变、电镜观察肺组织超微结构变化，初步探讨灯盏细辛（erigeronbreviscapine）通过抑制NF-κB活化对抗鼠LIRI损伤的可

3、能机制。材料和方法：健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠32只,3％戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔内注射麻醉，麻醉成功后肌肉注射阿托品0.04mg/kg。气管切开后插管连接小动物呼吸机控制呼吸，呼吸频率60次/分，吸呼比为1:1.5，工作压力（即潮气量）0.02MP。经左侧第5肋间进入胸腔,游离左侧肺门,过阻断带,套胶管形成活结备阻断用。手术操作前经阴茎背静脉注射肝素钠100U/kg以维持肝素化。将大鼠随机分成4组（n＝8）：①假手术组（I组,术前三天每天腹腔注射生理盐水10ml/kg，单纯开胸165min，不阻断肺门）；②缺血-再灌注组（II组，术前三天每天腹腔注射生理

4、盐水10ml/kg，肺门阻断45min后再灌注2h）；③小剂量灯盏细辛组（III组，术前三天每天腹腔注射灯盏细辛25mg/kg，阻断45min后再灌注2h）；④大剂量灯盏细辛组（IV组，术前三天每天腹腔注射灯盏细辛50mg/kg，阻断45min后再灌注2h）。上述处理后，经颈动脉放血处死大鼠，并取左肺标本，所有标本放置于-70℃保存。观察各组肺组织湿干重比（W/D），MPO测试盒比色法检测各组肺组织MPO活性，应用SP法免疫组化及Westernblot法检测肺细胞核内NF-κB活性及含量〔以积分吸光度IA（目的条带/正常条带）代表蛋白的表达量〕，光镜下HE染色观察病理形态学改变、透射电

5、镜观察肺组织超微结构变化。I汕头大学医学院硕士学位论文结果：(1)肺组织W/D、MPO的变化：经缺血-再灌注后,II组肺组织中W/D以及MPO的水平较I组（假手术组）显著升高（p<0.01）；应用灯盏细辛后，III、IV组W/D、MPO含量明显低于II组（p<0.01）。III、IV组之间比较差异有显著意义（p<0.01）。(2)NF-κBp65蛋白含量：免疫组化：再灌注后II组见大量细胞胞核强阳性着色,胞浆亦呈阳性着色。III、IV组胞核着色较II组明显减少,较I组略多。Westernblot：II组单纯缺血-再灌注后NF-κB的IA值明显高于I组（p<0.01）；注射灯盏细辛后，I

6、II、IV组肺组织细胞核中NF-κBIA值明显低于II组（p<0.01）。且IV组IA值显著低于III组（p<0.01）。(3)肺组织病理变化：II组中肺组织损伤进行性加重，毛细血管充血、肺泡间隔炎性细胞浸润、肺泡腔内炎症细胞及炎性液体渗出显著。IV组应用灯盏细辛后，肺组织充血、水肿、炎症细胞浸润的程度较II组明显减轻。III组变化介于II、IV组之间。(4)肺组织超微结构变化：II组血管内皮细胞肿胀，内皮细胞间隙增大；内皮细胞及肺泡上皮细胞的胞质空泡化，线粒体肿胀明显。IV组可见较多正常线粒体，各细胞肿胀显著减轻。III组可见少许正常线粒体。结论：(1)灯盏细辛可以减轻大鼠LIRI损

7、伤，且这种作用与剂量有关，大剂量作用比小剂量显著。(2)灯盏细辛可以抑制NF-κB活化，从而在转录水平调控炎症介质分泌，减轻炎症反应及其引起的损伤。(3)灯盏细辛可以减少再灌注后中性粒细胞（PMN）在肺内聚集、浸润，从而减轻PMN引起的一系列损伤。关键词：灯盏细辛；肺；再灌注损伤；核转录因子-κB（NF-κB）；髓质过氧化物酶（MPO）II汕头大学医学院硕士学位论文ABSTRACTBackgroundandObjectiveIschemiare