紫癜性肾炎患儿pbmc nf--κb的变化及黄芪的干预作用

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1、温州医学院硕士学位论文紫癜性肾炎患儿PBMCNF--κB的变化及黄芪的干预作用姓名：宗冬梅申请学位级别：硕士专业：儿科学指导教师：康国贵2012-05-23温州医学院硕士学位论文紫癜性肾炎患儿PBMCNF-KB的变化及黄芪的干预作用中文摘要目的：探讨核因子-v．B(nudearfactorkappa-v,B，NF-诏)在儿童紫癜性肾炎(Henoch-Schonleinpurpuranephritis，HSPN)中的作用：观察黄芪对HSPN患儿外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)中N

2、F—KB活性的影响，以阐明黄芪的作用机制。方法：全部研究对象于清晨抽取空腹血5ml并提取PMBC，加入含lOOml／L新生小牛血清的RPMI1640培养液调整细胞数为2×109L～，各取lmljl[1入6个试管中，分别做如下处理：1)对照组：单纯含培养液。2)刺激剂组：加入NF-KB刺激剂IL-1B。3)抑制剂组：加入NF—KB抑制剂TPCK。4)黄芪组：在对照组的基础上再加黄芪注射液。5)刺激剂+黄芪组：在刺激剂组的基础上再加黄芪注射液。6)抑制剂+黄芪组：在抑制剂组的基础上再加黄芪注射液。各管均放置于37℃温箱中恒温培养lOd,时

3、后离心(1700r／min，7min)，留细胞沉渣，采用核蛋白提取试剂盒提取核蛋白，采用ELISA检狈IJNF-KB活性，酶标仪于主波450nm,测吸光度(OD)值。结果：1．健康儿童各组PBMCNF-KB活性的变化在健康儿童PBMC中NF-KB存在一定的活性(0．261±0．046)；刺激剂组与对照组比较显著升高(0．371±0．05VS0．261±0．046，P<0．01)；抑制剂组与对照组比较显著下降(0．137±0．036VS0．261±0．046，P<0．01)；黄芪组与对照组比较无显著差别(0．256±0．052VS0．2

4、61±O．046，P>0．05)；刺激剂+黄芪组与刺激剂组比较显著下降(0．319±0．052VS0．371±0．059，P<0．01)；抑NN+黄芪组与抑制剂组比较显著下降(0．178±0．039VS0．137±0．036，P<0．01)。2．HSPN各组PBMCNF-KB活性的变化，温州医学院硕士学位论文在HSPN患儿PBMCNF-KB活性刺激剂组与对照组比较显著升高(0．492±0．057VS0．378±0．042，P<0．01)；抑制剂组与对照组比较显著下降(O．1884-0．022VS0．378±0．042，P<0．01)；

5、黄芪组与对照组比较显著下降(0．329±0．038VS0．3784-0．042，P<0．01)；刺激剂+黄芪组与刺激剂组比较显著下降(O．401±0．039VS0．492±0．057，P<0．01)；抑制剂+黄芪组与抑制剂组比较显著升高(0．245±0．029VS0．188±0．022，P<0．01)。3．HSPN组与健康对照组NF—KB活性的比较HSPN组的所有组别中PBMCNF—KB活性(OO值)均明显高于健康对照组(0．378±0．042VS0．261±0．046；0．492±0．057VS0．371±0．059：0．188±0

6、．022VS0．137±0．036；0．3294-0．038VS0．256±0．052；0．401±0．039VS0．319±0．052；0．245±0．029VS0．178±0．039，P均<0．01)。4．黄芪对HSPN组与健康对照组PBMC的NF-KB活性作用的比较HSPN的患儿的黄芪组与对照组的OD值差值与健康对照组相应组间差值的比较(0．049±0．042VS0．005±O．019，P<0．01)、HSPN的患儿的黄芪组+刺激剂IL—l13与刺激剂工L—lB的0D值差值与健康对照组相应组问差值的比较(0．091±0．043V

7、S0．052±0．032，P<0．01)、HSPN的患儿的黄芪组+抑制剂TPCK与抑制剂TPCK的oD值差值与健康对照组相应组间差值的比较(0．057___0．036VS0．041±0．025，P<0．01)，各组在统计学上均有显著性差异。结论：1．健康儿童PBMC中NF—KB存在一定的活性。2．HSPN患儿PBMC中NF—KB活性增高，是HPSN的发病机制之一。3．黄芪对健康儿童PBMCNF-KB活性没有影响。4．黄芪能降低HSPN患儿PBMCNF—KB活性。5．黄芪对NF—KB活性具有双相调节作用。关键词紫癜性肾炎；外周血单个核细

8、胞；核因子一KB；黄芪；3Changesofactivityofperipheralbloodmononuclearcellsnuclearfactor-r,BinchildrenwithHenoch．．．．Schonl