文昌鸡促卵泡素β亚基基因的单链核苷酸多态性及其与产蛋性能的相关性研究

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1、山东农业大学硕士学位论文文昌鸡促卵泡素β亚基基因的单链核苷酸多态性及其与产蛋性能的相关性研究姓名：王青娟申请学位级别：硕士专业：基础兽医学指导教师：尹逊河；王慧20120615山东农业大学硕l：学位论文摘要从分子遗传学角度研究鸡的产蛋机理，不但有助于加速高产蛋鸡品种或品系的培育，而且对我国地方鸡种资源的保护和开发利用等都有重要意义，尤其是对鸡的遗传学和内分泌学等方面的研究有重要的指导意义。文昌鸡是在海南热带亚热带特定的自然环境下，经过长期的人工选育而培育出的具有典型地方品种特征的著名品种，是我国家禽品种资源基因库中的宝贵财富。海南省的自然日照

2、时间较长，导致文昌鸡性成熟较早，母鸡127d产蛋率达5％。可能与长光照通过视神经刺激鸡的性腺发育，促进家鸡的性成熟有关。促卵泡激素(Follicle．stimulatinghormone。FSH)是由垂体前叶分泌的一种糖蛋白类促性腺激素，在下丘脑一垂体—性腺繁殖轴中起到重要作用。FSH是由a和p两个亚基组成的，其中a亚基为hCG、LH、TSH等糖蛋白激素所共有，’而特异性的D亚基决定其特异结合位点，并决定其生物学功能。0t和p亚基单独都不具有生物活性，二者结合在一起时，会引起结构上的变化，才具有生物学活性。本研究以文昌鸡为对象，研究FSHJ3

3、基因第2和3外显子和第1和2内含子的单链核苷酸多态性及其与文昌鸡产蛋性能之间的关系。根据GenBank中发表的鸡FSHl3基因第2、3外显子和第1、2内含子的序列设计3对引物，运用PCR．SSCP技术，在FSHl3基因内含子1检测到一个突变位点，并分析了其变异与鸡早期产蛋性能的相关性，主要研究结果如下：在3对引物中，有1对引物扩增片段存在多态性，扩增序列的突变位点位于FSHl3基因内含予1上。根据文昌鸡FSHl3基因内含子l的序列设计引物，进行特异性扩增，并在不同的电泳条件下进行PCR-SSCP分析，得到两种基因型AA和AB。通过测序获得了S

4、NP多态性位点，发现在内含子1的914处发生了A-÷C的碱基突变。统计分析了FSHl3基因内含子l区域的SNP多态性与文昌鸡产蛋性状的相关性，发现，产总蛋量、18—2l周产蛋量(NE．(18．21)W)、35．39周产蛋量(NE．(35—39)W)、畸形蛋数及开产日龄的差异均不显著(P>O．05)，但是，后期产蛋数，即22—34周龄产蛋量(NE．(26．34)W)差异显著，AA型显著多于AB型文吕鸡促卵泡素B弧基基因的单链核苷酸多态性及其’j产篮性能的相关性研究(P<0．05)。18—39周的体重差异均不显著(P>O．05)。文昌鸡P1引物扩

5、增获得2个等位基因，基因型AA和AB型的频率分别为O．49和0．51。两种等位基因型A和B的频率分别为0．74和0．26。经卡方适合性检验得知，文昌鸡内含子l处的基因型分布达到哈代．温伯格平衡状态(P>O．05)。关键词：文昌鸡；SNP；PCR-SSCP；FSHp基因；开产日龄2山东农业大学硕士学位论文Abs仃actTostudythemechanismofeggproductionfromtheperspectiveofmoleculargenetics，isnotonlyusefultoacceleratethecultivationof

6、thevarietiesandstrainsofthehighlayers，tobethesignificanceoftheprotection,developmentandutilizationoflocalchickenbreedsinChinaand，butalsothestudyhasimportanttheguidingsignificanceinchickengeneticsandendocrinology．Wenchangchickensisthepreciouswealthofresourcesinthegenepoolofs

7、peciesofpoultryinChina，whichhasthelocalvarietiestypicalcharacteristicsthroughthemassesoflong·termbreedinginHainan'stropicalandsubtropicalspecificnaturalenvironment(GengZhaoyuetal，2003)．Longlightstimulateschickengonadaldevelopment，andpromotesexualmaturationinthechickenthroug

8、htheopticnerve．LongnaturalsunshineinHainanleadstoearlierprecociouspubertyofWenchan