鸡抑制素a亚基重组融合蛋白的制备及免疫提高粤黄鸡 产蛋性能的研究

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1、农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2006,14(1):27~32·研究论文·免疫抑制素提高粤黄鸡产蛋性能的研究*于迎春施振旦**刘颖黄运茂张细权(华南农业大学,动物科学学院,广州510642)摘要:将鸡抑制素琢亚基成熟肽cDNA片段克隆入表达载体pRSETA的H玉和d芋位点之间，在大肠杆菌()BL21(DE3)中表达了分子量为15.8kD左右的重组鸡抑制素融合蛋白,在0.005mmol/LIPTG诱导4h时达最高表达量,约占总菌体蛋白的37%。将此融合蛋白用Ni-NTA树脂经亲

2、和层析纯化后与矿物油佐剂制成蛋白含量为1mg/mL的免疫原。对25只240日龄的粤黄鸡种()母鸡在第5和第26天肌肉注射1mL重组鸡抑制素融合蛋白免疫原,另外25只种鸡接种1mL不含蛋白的油乳剂。免疫组鸡在首次免疫后血浆抗重组鸡抑制素的抗体水平持续且极显著高于对照组(<0.01)。在50d试验期内，免疫组鸡的产蛋量在第2次免疫后明显高于对照组约5%~8%左右,表明鸡免疫抑制素重组融合蛋白仅能有限地提高其产蛋性能。关键词：家鸡;抑制素琢亚基片段;重组质粒;融合蛋白;主动免疫中图分类号:S184S188文献标识码:A文章编号:100

3、6-1304(2006)01-0027-06StudyonIncreasingLayingRateinYuehuangChickenHensbyImmunizationAgainstInhibinYUYing-ChunSHIZhen-Dan**LIUYingHUANGYun-MaoZHANGXi-QuanChickeninhibin琢subunitmaturepeptidecDNAfragmentwasinsertedintotheexpressionvectorpRSETAbetweenH玉andd芋sites,toexpre

4、ssa15.8kDrecombinantchickeninhibinfusionproteininBL21(DE3).Themaximalexpressionlevelof37%ofthetotalbacterialproteinwasobtainedafterinductionoftherecombinantbacteriaby0.005mmol/LIPTGfor4h.TheexpressedfusionproteinwaspurifiedbyNi-NTAagrosechromatographyandhomogenizedwi

5、thmineraloilad-juvanttomakeinhibinimmunogencontaining1mg/mLprotein.Twenty-five240-dayoldYuehuanghens()wereeachinoculatedi.m.with1mLoftheabovepreparedimmunogenondays5and26,togetherwithanother25controlhensinjectedwiththemineraladjuvantonthesamedays.Hensimmunizedwithinh

6、ibindisplayedelevated(<0.01)bloodanti-inhibinfusionproteinanti-bodytitresaftertheprimaryimmunizationcomparedwiththecontrolhens,andexhibited5%~8%higherlayingratethanthatofthecontrolhensafterthe2ndimmunization.Theaboveresultsindicatedthatimmunizationagainstinhibinonlym

7、arginallyincreasedlay-ingperformanceinYuehuanghens.chickenhens;inhibin琢subunit;fusionprotein;immunization产蛋是养禽生产的重要环节之一，提高产蛋率定禽类的产蛋性能(Etches,1996)。在卵泡发育的调是种禽生产的首要任务。禽类的产蛋性能主要由发控中，发育程度高的卵泡很可能通过分泌大量抑制育至排卵的卵泡数量决定。家鸡的卵巢一般有6～素，抑制垂体FSH(folliclestimulatinghormone)的10个大黄卵泡，这

8、些卵泡按大小、形成、发育等级和分泌来抑制发育程度低的大黄卵泡和小黄卵泡的发次序先后排卵，能够发育至排卵的卵泡数量一般决育(Johnson,1997)；而最大的卵泡排卵后停止分泌抑*基金项目：由广东省科技计划项目（No.2003C20205）资助。于迎春：女，19