脂联素基因单核苷酸多态性与2型糖尿病的相关性研究

《脂联素基因单核苷酸多态性与2型糖尿病的相关性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、脂联素基因单核苷酸多态性与2型糖尿病的相关性研究【摘要】［目的］探讨脂联素基因H241P突变与2型糖尿病的关系［方法］随机选取377例无亲缘关系的吉林省延边地区朝鲜族和汉族人群，其中糖耐量正常者为195名，2型糖尿病患者为182名；行口服葡萄糖耐量实验，于实验前及实验后2h时检测血糖；用体重指数及腰臀比值评估体脂肪含量及分布；采用聚合酶链反应单链构象多态性方法对apM1基因突变进行初筛分析，并对异常带型标本进行基因序列测定［结果］在研究对象中发现脂联素基因H241P突变者为1例，属于2型糖尿病组，突变频率为0.5%［结论］脂联素基因H241P突变可能不是2型糖尿病的易感因素.【关键词】

2、糖尿病2型脂联素突变Relationshipbetorphismandtype2diabetesmellitusABSTRACT:OBJECTIVEToinvestigatetherelationshipbetutationintheadiponectingene(apM1)andtype2diabetes(T2DM)METHODSThestudiedpopulationalglucosetolerance(NGT)and182casesofT2DM.Plasmaglucoseeasuredat0and2hduringoralglucosetolerancetest.Thecontent

3、anddistributionofbodyfatassindex(BMI)andutationofapM1geneedbypolymerasechainreactionsinglestrandconformationpolymorphism(PCRSSCP),andthentheexactmutationatedDNAdirectsequencingRESULTSTheH241PmutationutationfrequencyutationinapM1geneellitus，　　type2；adiponectin；mutation脂肪组织不仅是能量储存组织，而且亦是控制能量平衡的内分泌

4、器官，在代谢状态改变及受外来刺激时它可分泌多种具有生理活性的蛋白质脂肪细胞因子，如肿瘤坏死因子(TNFα)、瘦素、抵抗素及脂联素(adiposemostabundantgenetranscript1,apM1)等.apM1参与糖和脂肪代谢的调节，增加胰岛素敏感性，并具有消炎及抗动脉硬化作用.研究结果表明，在胰岛素抵抗状态下，体内的apM1水平与胰岛素的敏感性呈正相关，而在2型糖尿病、肥胖症及冠心病患者的血液中apM1水平则降低［1］，提示apM1与代谢综合征的发生密切相关.本研究从基因变异的角度探讨了apM1与2型糖尿病发生的相关性.1对象和方法1.1研究对象的选择及分组所有被调查者均

5、为吉林省延边地区的朝鲜族和汉族人群，彼此间无亲缘关系，且双亲连续三代为同一民族，人群相对比较稳定，遵循知情自愿的原则.根据1997年美国糖尿病学会（ADA）诊断及分型标准分组，即糖耐量正常组及2型糖尿病组.糖耐量正常组为195人，其中朝鲜族为97人，汉族为98人；年龄为39～60岁，平均为51岁；男性为92例，其中汉族为49例，朝鲜族为43例，女性为103例，其中汉族为51例，朝鲜族为52例.2型糖尿病组为182人，其中朝鲜族为90人，汉族为92人；年龄为40～61岁，平均为52岁；男性为79例，其中汉族为40例，朝鲜族为39例，女性为103例，其中汉族为51例，朝鲜族为52例.两组研究

6、对象的民族、年龄及性别构成比间均无显著性差异，具有可比性.1.2试剂琼脂糖、PCR引物、PCR标记物、PCR反应试剂均为美国Promega公司产品；溴化乙锭为Amresco公司产品；DNA提取试剂盒为上海华舜生物工程有限公司/上海华尧核酸技术有限公司产品.1.3方法1.3.1生物化学指标与体脂肪含量及分布的测定隔夜空腹10h后，行口服葡萄糖耐量实验，于实验开始及后2h时各取静脉血10mL，测定葡萄糖（氧化酶法）、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇；同时测量身高及体重，计算体重指数及腰臀比值，进行体脂肪含量及分布估测.1.3.2DNA的提取及PCR扩增取每个研究对象

7、外周血1mL，置于ACD抗凝管中，-20℃保存备用.用小量基因组DNA提取试剂盒制备基因组DNA，4℃保存，经紫外分光光度计分别测定OD值，结果OD值在波长260～280nm范围内均大于1.6，提示DNA的纯度好，质量浓度均在200mg/L以上.从基因库中查人类apM1基因序列，用Primer3软件进行在线引物设计，合成片段长度为394bp，上游引物为5′GAAGGACAAGGCTATGCTC3′，下游引物为5′GAGGAC