脂联素基因启动子区多态性与肥胖、2型糖尿病的相关性

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1、脂联素基因启动子区多态性与肥胖、2型糖尿病的相关性：叶枫，何岚，李建宁，董春萍，于杰【摘要】目的探讨中国人群内脂联素基因启动子区-11391G/A、-11377C/G基因多态性以及突变与肥胖、2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法选取研究对象共305名，利用聚合酶链反应限制性内切酶片段长度多态性(PCRRFLP)方法鉴定-11391G/A、-11377C/G基因型。结果①在所选群体中未发现-11391G/A突变；②以基因型分组：-11377GG基因型体重指数(BMI)值明显高于CC，CG基因型，且具有

2、统计学意义(P<0.05)；GG基因型舒张压、收缩压明显高于CC，CG基因型，且与CG基因型差别有统计学意义(P<0.05)；CC基因型高密度脂蛋白(HDL)最高且与CG基因型差别有统计学意义(P<0.05)。结论在西安人群内未发现-11391G/A突变；-11377C/G基因多态性与BMI的相关性具有统计学意义；未发现11377C/G基因多态性与2型糖尿病的相关性。【关键词】脂联素；糖尿病；肥胖；基因多态性　　ABSTRACT:ObjectiveTostudythecorrelati

3、onofSNPs-11391G/A,-11377C/Gutationoreover,GGgenotypeatposition-11377hadanincreasedriskofhighsystolicbloodpressureanddiastolicbloodpressureparedutationhasnotbeenfoundinourresearchpopulation;SNP-11377C/GmaycontributetothegeicriskforBMIbutnotT2DM.　　KEY组：共20

4、4例，个体间无亲缘关系，其中男120例，女84例。年龄均≥40岁，平均(54.65±11.81)岁，糖尿病的诊断依据1997年美国糖尿病学会的标准。②正常对照组：共101名，其中男73例，女28例，年龄均≥40岁，平均(57.93±12.13)岁，均为经口服葡萄糖耐量试验(OGTT)排除糖尿病的我院体检的正常人，无糖尿病家族史。　　1.2方法　　1.2.1专人测血压、身高、体重、腰围及臀围、计算体重指数(BMI)血甘油三酯(TG)及血总胆固醇(TC)用酶法测定。FPG采用指端末梢血测定(罗氏公司)；空腹

5、血胰岛素(FINS)采用放免法。　　1.2.2脂联素基因-11391G/A或-11377C/G变异的检测①DNA的提取：取空腹静脉血(EDTA抗凝)0.2mL，用全血DNA提取试剂盒(北京天为时代科技有限公司产品)抽提基因组DNA；②PCR扩增：从Genbank中查取人脂联素基因序列，由北京奥科公司设计合成引物[2]：上游引物(24bp):5′TGGTGGACTTGACTTTACTGGTAG3′,下游引物(21bp)：5′TAGAAGCAGCCTGGAGAACTG3′。PCR反应体系(25μL)：模板D

6、NA1.5μL，上下游引物各1.3μL，2×MasterMix(北京天为时代)12.5μL，ddH2O8.4μL。PCR反应条件：95℃预变性10min后进入主循环，变性95℃1min，退火61℃30s；延伸72℃1min，共36个循环，完成后72℃维持10min，扩增在PCR仪(美国PerkinElmersCetus公司产品)上完成。扩增产物用20g/L琼脂糖凝胶电泳检测，以100bp为标志物长度间距(天为时代MarkerⅠ)，产物片段大小为335bp；③酶切：37℃酶切水解4-16h。酶切产物以25

7、g/L的琼脂糖凝胶电泳，溴乙锭/紫外线检测。-11377C/G用Hha1(Fermentas公司产品)限制性内切酶酶切，-11391G/A分别用HapⅡ(Takara公司产品)和AIuI(Fermentas公司产品)限制性内切酶酶切。　　1.3统计学处理运用HardyI≥25)和非肥胖组(BMI＜25)，比较脂联素基因频率的分布，BMI≥25组GG基因型频率明显高于BMI＜25组，但差异无统计学意义(P>0.05，表2)。我们还分析了以糖尿病和正常人分组，BMI分层后各组间-11377C/G基因

8、频率的差别，结果无论糖尿病组还是正常组，BMI≥25相对于BMI＜25的GG基因型均有明显增高的趋势，但无统计学意义。　　表1-11377C/G基因型和等位基因频率在糖尿病组和对照组中的分布（略）　　Table1Frequencydistributionof-11377C/Gindiabetesandcontrolgroups　　T2DM:type2diabetesmellitus;NC:normalcontrol　　表2-11377C/G