人脂肪源间充质干细胞对顺铂致小鼠急性肾损伤的影响

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1、新乡医学院硕士学位论文人脂肪源间充质干细胞对顺铂致小鼠急性肾损伤的影响姓名：胡丹申请学位级别：硕士专业：儿科学指导教师：杨达胜201203新乡医学院硕士学位论文人脂肪源间充质干细胞对小鼠急性肾损伤的影响摘要目的人脂肪源问充质干细胞(adipose—derivedstemcells，hADscs)是来自脂肪组织中的一种多能间充质干细胞，除了具有间充质干细胞的特点外，人ADSCs还有免疫原性较低、体外稳定增值、不易衰亡、取材方便等优势。本实验建立在顺铂致小鼠急性肾损伤(AcuteKidneyInjury，AKI)模型上，将hADSCs通过尾静脉移植入小鼠体内，观察其对小鼠AK工的影响，并探

2、讨其可能的作用机制。方法将24只小鼠随机分为三组，每组8只：分别为『F常对照组(A组)、生理盐水组(B组)、人ADSCs组(C组)。体外培养扩增人ADSC细胞，用荧光染料标记。A组小鼠不做处理，B、C组小鼠先给予单次腹腔注射顺铂溶液12．Omg／kg，24小时后AKI制备完成。B组小鼠尾静脉注射O．2m1无菌生理盐水，C组尾静脉注射0．2m1人ADSCs细胞悬液。检测以下指标：①自动生化仪检测血肌酐、尿素氮水平；②光镜下观察肾组织病理改变；③TUNEL法标记肾小管上皮细胞的凋亡：④免疫组化法检测肾小管细胞PCAN表达；⑤ELIsA法检测肾组织中TNF一1a、LI一6含量；⑥免疫荧光显微

3、镜下观察肾组织上DAPI标记细胞。争士甲：口木1．A组小鼠血清肌酐为(43．68±3．6)¨mol／L；B、C组血清肌酐分别为(120．77±15．31)¨mol／L、(87．24±11．07)“m01／L，与A组相比，具有差异具有统计学意义(尺O．05)；B、C相比较，C组较B组降低明显(尺0．05)。A组小鼠血清尿素氮为(14．74±2．24)嗍01／L；B、C组血清尿素氮分别为(30．55±3．7)mm01／L、(22．65±1．11)mmol／L，与A组相比较，差异具有统计学意义(尺0．05)；B、C相比较，C组较B组降低明显(尺0．05)。2．肾近端小管上皮细胞坏死明显，根据

4、肾小管坏死程度，采用半定量病理评估法评分，评分越高说明肾小管坏死越严重。A组评分为O，B、C组评分分别为(3．13±0．23)、(2．O±0．27)；B、C组较A组明显偏高，差异具有统计学意义(尺0．05)，B、C相比较，差异有统计学意义(尺0．05)。3．A组凋亡细胞数为(3．88±0．44)个：B、C组凋亡细胞数目分别为(24．751新乡医学院硕士学位论文±3．00)个、(18．00±2．07)个，与A组比较明显增多，差异有统计学意义(尺0．05)；B、C相比较，B组较C组明显增高，差异有统计学意义(尺0．05)。4．A组为阴性对照组；B、C组阳性数目分别为(15．63±2．71)

5、个、(24．50±2．28)个，与A组比较，差异有统计学意义(尺0．05)，B组较C组明显减少，差异具有统计学意义(尺O．05)。5．A组TNF—a含量为(101．65±8．52)pg／m1；B、C组含量分别为(203．62±25．37)pg／ml、(151．82±10．89)pg／m1，与A组相比较，差异有统计学意义(尺0．05)；B、C相比较，B组较C组明显升高，差异有统计学差异(尺0．05)。A组IL一6含量为(73．39±5．32)pg／m1；B、C组含量分别为(156．57±8．69)pg／m1、(129．80±4．68)pg／ml，与A组相比，差异有统计学意义(尺0．05)

6、，B、C相比较，B组较C组明显升高，差异有统计学意义(尺O．05)。6．免疫荧光染料下观察肾组织冰冻切片，少量切片上仅见数个少量蓝色荧光发光细胞。结论1．人ADSCs对顺铂致小鼠急性肾损伤具有促修复的作用；2．人ADSCs可能是通过减少炎症因子TNF一1a和IL一6的合成或释放、肾小管细胞的凋亡及促进损伤的肾小管细胞增殖起到促进肾功能修复的作用。关键词人脂肪源问充质干细胞；急性肾损伤；顺铂；小鼠2新乡医学院硕士学位论文EffectofHumanAdipose-deriVedStemCeUsonCisplatininducedAcuteKidneyInjuryinMiceAbstract

7、0bjectiVesHumanadipose-deriVedstemcells(hADscs)deriVefromhumanfattissueandhassimilarcharacteristicsasbonemarrowmesenchymalstemcells，andlowimmunogenicity．ThisexperimentbasedontheCisplatininducedAcuteKidneyInjuryAKIinmice，then