n-乙酰-d-葡萄糖胺-2-差向异构酶(gne)基因的克隆、表达与抗体制备

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1、温州医学院硕士学位论文N-乙酰-D-葡萄糖胺-2-差向异构酶（GNE）基因的克隆、表达及抗体制备姓名：余云彦申请学位级别：硕士专业：药理学（微生物与生化药学）指导教师：李校堃;林绍强20090501温州医学院硕士学位论文1：1、1：2、1：4、1：8、1：161一(thereiswhiteAntigen—antibodyprecipitationline)．80itisnecessarytodothefurtherELISAtodetecttheconcentrationofantibody．Keyw

2、ords：N-acetyl．-D--glucosamine．．2．．epimerasecloningpurifiedantibodypreparation7温州医学院硕士学位论文缩略词表SA(Sialicacid)Neu5Ac／NANANeu5GcKDNCA／PSAGNE／AGENAIDM吸VNⅡ)DMKan口TGX．GalHAⅣ【2NANPPB2PAⅡNVTNFTCRPSANCAM唾液酸N一乙酰．D．丰中经氨酸N．羟乙酰神经氨酸去氨酸神经氨酸多聚唾液酸N．乙酰．D．葡萄糖胺．2．差向异构酶唾液酸裂解

3、酶远端肌病非胰岛素依赖型糖尿病卡那霉素异丙基．B．D．硫代半乳糖苷B．半乳糖苷酶血细胞凝集素基质蛋白2病毒神经氨酸酶核蛋白RNA聚合酶碱性蛋白2聚合酶酸性蛋白丫干扰素肿瘤坏死因子T细胞受体多聚唾液酸神经细胞粘附分子温州医学院硕士学位论文学位论文独创性声明本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确说明并表示谢意。作者签名：日期：鲤2尘丝

4、关于学位论文使用授权声明本人完全了解温州医学院有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。60日期：一导师签名：温州医学院颁士学位论文1．前言1．1SA的结构与分布唾液酸(Sialicacid，SA)是一族化合物的总称。早在1927年，美国的Landsteine

5、r【l】等人就发现特定的动物脂质制备物中含有类似糖的组分，与Bial’S试剂反应呈紫色。自从Blix(1936)从牛颌下腺分离出SA以来，人们对SA的结构、分布、代谢、生化特性、免疫学特性、生物学功能等作了大量的研究。此后，用同样方法，又从牛初乳、卵黄和燕窝中相继分离得到完整的、可被结晶的唾液酸【zJ。由于SA的分子结构不同于一般的戊糖或己糖。并且总是处在糖链的末端：一个十分敏感的位置上，故其直接参与发生在细胞膜上的许多重要反应，随后人们又发现它是恶性肿瘤存在和发展的标志物。SA是一族化合物的总称．它

6、们都以九碳酮糖酸——神经氨酸(Neuraminicacid)为骨架，结构式【3J如图1所示。H3OH图1：唾液酸。C2处形成的糖苷键是半缩醛的一部分，C2可以与其他糖分子的羟基发生反应。因为C3和C6没有羟基，故无法形成糖苷键，唾液酸通常在糖链的末端(C8有羟基，故有时是糖苷键)，其末端对免疫识别和细胞粘附有决定性的作用。Fig1：Sialicacid．Theglycosidiclinkageformsatcarbon撑2，sinceitispartofahemiacetal．Thisreactswi

7、ththe0Hgroupofanothersugarmolecule．Becausethej!j}3and拌6carbonsofsialicacidhavenoOHgroupsandt}lUSdonotlendthemselvestoglycosidicbondformation．sialicacidnormallyattachesonlyasaterminalresidueinthesaccharidechains(theOHatcarbon8does，however，sometimespartic

8、ipatein温州医学院硕士学位论文glycosidiclinkages)．Itsterminalpositioninggivesitacrucialroleinimmunesystemrecognitionandcelladhesion．如果把神经氨酸从C3和C4处分开，神经氨酸分子又可以看作是由丙酮酸分子和甘露糖胺分子缩合而成。实际上，这么看更接近于它在生物体内的合成途径。C5上的氨基，C4，C7和C9上的羟基都可以被其他基团取代，形成各种衍生物，统