三氧化二砷对三阴性乳腺癌细胞(mda-mb-231)的化疗增敏作用

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1、复旦大学硕士学位论文硕士学位论文三氧化二砷对三阴性乳腺癌细胞（MDA-MB-231)的化疗增敏作用TheenhancementandmechanismofarsenictrioxideonchemosensitivityofhumanbreastcancerMDAHVIB—231cellsinvitro中山医院专业:外科学姓名:胡嘉指导教师：陆维祺主任医师导师组成员：江颖副主任医师张华主治医生郑嘉嘉主治医生完成日期:2012年4月3日复旦大学硕士学位论文目录巾錢￥1数觀3目US5三氧化二砷对三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的

2、化疗增敏作用71、实验材料与方法142、实验结果223、舰292429mm38WlM39复旦大学硕士学位论文中文摘要三氧化二砷对三阴性乳腺癌细胞（MDA-MB-231)的化疗增敏作用目的：研究三氧化二砷联合经典化疗方案在体外对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长和凋亡的影响。方法：1)用不同浓度（0.2、0.4,0.6,0.8,1.0ymol/L)的三氧化二砷作用MDA-MB-231细胞24h、48h、72h后，用噻唑蓝（MTT)比色法检测细胞生长情况，并且在作用24h后用Westernblot检测细胞的PCNA的

3、水平，选择合适的三氧化二砷浓度进行下一步实验。2)用普通化疗药或三氧化二砷联合作用MDA-MB-231细胞24h、48h、72h后，用噻唑蓝（MTT)比色法检测各组MDA-MB-231细胞的增殖活性，并且在作用24h时用AnnexinV/PI双染检测各组MDA-MB-231细胞的凋亡率，Westernblot检测各组MDA-MB-231细胞的PCNA、Caspase-3水平结果：1)用不同浓度的三氧化二砷作用MDA-MB-231细胞24h、48h、72h后，随着三氧化二砷剂量的上升，MDA-MB-231细胞的增殖抑制效应逐渐增加，呈时间和剂量

4、依赖性，其中在1.0umol/L时抑制最明显，并且在作用24h时PCNA表达水平随浓度上升呈降低趋势，所以我们选择1.Oumol/L进行下一步实验。2)用普通化疗药或三氧化二砷联合作用MDA-MB-231细胞24h、48h、72h后，三氧化二砷联合化疗组抑制率最高。并且随着药物作用时间的延长，呈现时间依赖性，并且与对照组比较，各组早期凋亡率分别是50.52%、25.84%、20.31%、21.14%、20.43%,当把三氧化二砷和其他各组比较，5组较各组凋亡率明显增加，有统计学差异(P<0.05)’同时检测到PCNA表达减少和caspase-

5、3表达增加，其中三氧化二砷联合化疗组（5组）最明显，与联合化疗组（4组）及单药组（1组、2组、3组）PCNA表达有明显差异（P〈0.05),各单药间差异不明显（P>0.05)。结论：三氧化二砷与化疗药物对MDA-MB-231细胞具有协同作用，其机制可能与下调PCNA表达，上调Caspase-3表达的促调亡途径有关。【关键词】三阴性乳腺癌；三氧化二砷；PCNA;Caspase-31复旦大学硕士学位论文AbstractTheenhancementandmechanismofarsenictrioxideonchemosensitivityofhu

6、manbreastcancerMDA-MB-231cellsinvitroPurpose:ThisstudyaimedtostudygrowthandapoptosisoftriplenegativebreastcancerMDA-MB-231cellsinvitrowhenarsenictrioxideiscombinedwithclassicalchemotherapy.Methods:1)whenMDA-MB-231cellsaretreatedwithdifferentconcentrationsof(0.2,0.4,0.6,0.8?

7、1.0umol/L)arsenictrioxidefor24h、48h、72h，thegrowthinhibitionisdetectedbythiazolylblue(MTT)assay，andwhenthecellsaretreatedfor24h，TheproteinexpressionofPCNAwasdetectedbyWesternblotting,thenweselecttheappropriateconcentrationofarsenictrioxideforthenextexperiment2)whenMDA-MB-231

8、cellsaretreatedwithchemotherapyandcombinedwithAS203for24h、48h、72h，thegrowthinhibit