气单胞菌腹泻的检测方法探讨

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1、气单胞菌腹泻的检测方法探讨郎丽萍金鹏赵玉芹(山东省青州市人民医院山东青州262500)【中图分类号】R446.5【文献标识码］A【文章编号】1672-5085(2012)51-0145-02【摘要】目的对急性腹泻患者粪便进行气单胞菌分离培养。方法木研究对220例急性腹泻患者的粪便标木，采用细菌分离和增菌分离两种方法进行培养。结果检出气单胞菌阳性41份，阳性率为18.63%o结论从分离培养的效果观察，氨节青霉素无盐碱性琼脂要比SS琼脂优越，此法对气单胞菌的分离阳性率较高。【关键词】气单胞菌分离方法SS琼脂Mac琼脂氨节无盐碱性琼脂气单胞菌广泛分布于水

2、系环境，过去认为是淡水鱼、青蛙等冷血动物的病原菌，近年来的研究表明，该菌对人体可引起腹泻，创伤感染、脑膜炎等多种疾病，但大多数菌株来自肠道感染，该菌可致轻度或重度腹泻，是引起胃肠炎和食物中毒的重要病原菌，为此我们对220例急性腹泻患者粪便使用多种方法进行气单胞菌分离培养。1材料与方法1.1检测对象对我院2004-2010年220例急性腹泻患者作为研究对象,采集患者新鲜粪便置Carry-Blair运送培养基2h内送检。1.2细菌分离方法1.2.1直接分离法：将粪便制成无菌牛理盐水悬液，挑去2接种环直接种SS琼脂和Mac琼脂,37°C24h后观察牛化反

3、应和取斜面培养物做氧化酶试验。1.2.2增菌分离法：用无菌棉拭子沾取粪便悬液种于l%Nacl碱性月东水37°C6-8h增菌培养，然后同时转种SS琼脂和添加氨节青霉素(20ug/ml)的无盐碱性琼脂，37°C24h分离培养，挑取SS琼脂平皿上的可疑菌落和氨莘青霉素无盐碱性琼脂平板上的氧化酶呈阳性菌落，同时转种克氏双糖铁和营养琼脂斜面。1.3牛化鉴定和种别间鉴定凡氧化酶试验阳性，在克氏双糖铁培养基上分解葡萄糖产酸(或产气)，不分解乳糖（少数例外），不产生硫化氢和有动力菌株再进行进一步系统生化鉴定。2结果2.1四种方法的检测比较220份标本用四种方法检出

4、气单胞菌阳性41份，阳性率为18.63%。（附表）附表四种方法对气单胞菌的分离阳性率由附表可以看出，四种方法中b法阳性率最低，d法阳性率最高。2.2腹泻患者气单胞菌感染情况220例急性腹泻患者有41例感染气单胞菌，从41例检出的气单胞菌经种鉴别共有45株菌株，其中3例属气单胞菌属内混合感染，占气单胞菌阳性的7.31%O3讨论气单胞菌的常规培养大致与肠杆菌科致病菌相同，即粪便直接分离于SS或Mac平板，但据国外报道[1,2],肠道琼脂作为气单胞菌的原始培养基分离效果并不满意，因而多推荐采用XDCA（木糖■去氧胆酸盐■枸椽酸盐）和ASBA（氨节青霉素血

5、琼脂）等培养基，如事先用l%Nacl碱性腺水增菌，可获取更好的分离效果。从分离培养基的效果观察，SS琼脂要比Mac琼脂优越（P<0.001）,而氨节青霉素无盐碱性琼脂要比SS琼脂优越（P<0.001）,可能由于氨节青霉素和弱碱环境能抑制肠道某些正常菌群，并可直接做氧化酶试验，使菌落容易辨认:同时由于培养基中不含盐，使副溶血性弧菌等嗜盐性弧菌不能生长，故用此培养基首先筛去了氧化酶阴性的肠杆菌科细菌和氧化酶阳性的嗜盐性弧菌，大大缩小了挑选菌落范围。关于气单胞菌的鉴定主要依靠生化反应来大致归类。本菌的鉴定首先应与容易混淆的肠杆菌科细菌相区别，其主要特征是

6、氧化酶阳性，可用于两者的鉴别，在氧化酶阳性的基础上，本菌应再进一步与弧菌属、邻单胞菌属相区别，疑为气单胞菌属吋再根据属内几种特异生化反应结果鉴定到种。参考文献⑴程知义etal•气单胞菌与传染性腹泻•国外医学临床生物化学与检验学分册,1986:；7(1)：11.⑵杨正吋气单胞菌分离与鉴定用培养基研究进展。国外医学微生物学分册,1990；13(1)：26.