从熊猫腹泻便中检出侵袭性大肠杆菌和豚鼠气单胞菌

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1、从熊猫腹泻便中检出侵袭性大肠杆菌和豚鼠气单胞菌【关键词】稀便;侵袭性大肠杆菌;豚鼠气单胞菌;质粒  [摘要]熊猫腹泻标本中同时检出侵袭性大肠杆菌(EIEC)和豚鼠气单胞菌(A.caviae),在国内尚未见报道。出现腹泻、发热要尽早做培养,找出致病原因。  [关键词]稀便;侵袭性大肠杆菌;豚鼠气单胞菌;质粒  熊猫腹泻标本中同时检出侵袭性大肠杆菌(EIEC)和豚鼠气单胞菌(A.caviae),在国内尚未见报道。出现腹泻、发热要尽早做培养,找出致病原因。EIEC和A.caviae引起人类和动物的腹泻在全世界许多国家都发现,我国今年来

2、相继也有不少报道。EIEC是重要的腹泻病源,通过污染食物、水等暴发流行[1]。EIEC侵入大肠上皮细胞并大量繁殖,导致局部严重炎症和溃疡,临床上常出现痢疾样症状[2]。2001年7月我们从一只熊猫发现腹泻便中检出1株EIECO29:K?和1株A.caviae。现报告如下。  1 临床症状5  西安市动物园熊猫4岁,雄性。于7月19日出现厌食、发热、尿频、腹泻、稀黏血便,临床脓球(+++)、血球1~3、黏液(++)、潜血(+)、孢子(-)、pH值为8.0。临床诊断为急性胃肠炎。  2 细菌学鉴定  用无菌棉签采集熊猫稀黏便一份,接

3、种于KS和营养琼脂平板[3]。37℃培养18h。从KS平板上挑选发酵乳糖及不发酵乳糖的两种可疑菌落,接种于由北京陆桥医学生物技术中心提供的综合生化管,经系统生化鉴定不发酵乳糖的细菌为大肠埃希菌、发酵乳糖的细菌为A.caviae[4]。再用兰州生物制品研究所提供的EIEC诊断血清进行血清试验发现与O29:K?有强凝集。故判断为EIECO29:K?。  2.1 不发酵乳糖菌落 不发酵乳糖的细菌为EIECO29:K?。  2.1.1 生化反应 其氧化酶、动力、H2S、尿素酶、VP、蔗糖、葡萄糖产气、枸橼酸盐、侧金盏花醇、葡萄糖酸盐、L

4、ys脱羧酶、Arg双水解酶、Org脱羧酶、Phe脱氨酶均为阴性[5];靛基质、MR、木糖、山梨醇、棉子糖均为阳性。  2.1.2 血清学试验 EIEC诊断血清OK多价(++++),O29(++++),K?(++++),生理盐水对照(―)。5  2.1.3 豚鼠角膜试验 用16h~18h培养物,以肉汤洗下制成8亿/ml的菌悬液,将豚鼠右眼角膜轻轻划痕5下,左眼加入胰滴肉汤对照,豚鼠右眼24h出现怕光、怕碰,结膜充血、浮肿、角膜发灰的症状,72h出现角膜发浊,眼角有脓性分泌物,不睁眼的症状,实验结果阳性。  2.2 发酵乳糖菌落 发

5、酵乳糖的细菌为A.caviae[7]。37℃肉汤中生长;O~F为发酵型。  2.2.1 生化反应 其氧化酶、Arg双水解酶、蔗糖、L阿拉伯糖、水杨苷、靛基质、动力、乳糖、KCN、七叶苷、麦芽糖、甘露醇均为阳性;肌醇、葡萄糖产气、H2SO/129抑制、LYS脱羧酶、ORG脱羧酶、VP、枸橼酸盐、6%氯化钠胨水均为阴性。  3 药敏试验  用纸片扩散KB法。药敏纸片由浙江省军区后勤防疫所提供,有效期内应用。EIECO29:K?对吡派酸、氟派酸、庆大霉素、丁氨卡那霉素高敏;对卡那霉素、痢特灵、新霉素中敏;对氨苄青霉素耐药。A.cavi

6、ae对吡派酸、氟派酸、痢特灵、庆大霉素、卡那霉素高敏;对丁氨卡那霉素中敏;对氨苄青霉素耐药。  4 讨论5  在临床细菌鉴定中,对这两种病原菌存在一定的误诊。气单胞菌与肠杆菌科、假单胞菌属及弧菌属性状很相似,如未做氧化酶试验易将其被误诊为肠杆菌科细菌。本次鉴定工作我们通过氧化酶试验将两种可疑菌落区分,为鉴定A.caviae提供了有力的佐证。同样,EIEC只有在用生化反应确定其菌株属性后,用LYS脱羧酶和动力试验初步确定为EIEC,才能用相应的分型血清进行血清型诊断,根据药敏试验正确选择抗生素治疗,对采取及时、有效的治疗提供可靠依

7、据。通过一系列鉴定工作,从一例腹泻熊猫粪便标本中检出EIECO29:K?和豚鼠气单胞菌(A.caviae),其生化及血清学、豚鼠角膜试验以及药敏学都完全符合这两种菌的特性。EIECO29:K?和A.caviae都可引起人和动物腹泻及其它临床症状。此次在腹泻便中检出,有助于我们提高对EIEC以及A.caviae的检测能力,同时,可以更全面地对这两种菌所引发的疾病进行监测和管理。  参考文献:  [1] 曲云文.从食品茶叶蛋和因食用茶叶蛋引起急性腹泻患者的粪便中道次分离到EIECO288ac[J].中华医学检验杂志,1985;8(1

8、):10.5  [2] 杨正时.痢疾样大肠杆菌O164国外医学微生物分册1978:(1):15.  [3] 何晓青.卫生防疫细菌检验[M].第一版南昌:新华出版社,1989:324.  [4] 朱吉云,杜印槐.从大便中同时分离出溶澡弧菌和温和气单胞菌[J].中国

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