能量限制通过调节igf-1水平影响成年雌性大鼠生殖潜能

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1、学位论文原创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。作者签名：日期：年月日学位论文使用授权声明本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档，允许论文被查阅和借阅；学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编论文；学校可以向国家有关部门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密的论文，

2、按照保密的有关规定和程序处理。作者签名：导师签名：日期：年月日日期：年月日能量限制通过调节IGF-1水平影响成年雌性大鼠生殖潜能Effectofcaloricrestrictiononthereproductivepotentialviamodulatingthelevelofinsulin-likegrowthfactor-1(IGF-1)inadultfemalerats姓名栗丽导师罗丽莉教授专业妇产科学单位汕头大学医学院第一附属医院课题来源：国家自然科学基金（No.81070458）汕头大学医学院2012年5月汕头大学医学院硕士学位论文摘要研究目的：观察能量限制（CaloricRe

3、strictionCR）对成年雌性大鼠生殖轴及卵泡发育的影响，并对其可能的调控机制进行探讨。材料与方法：取8周龄雌性SD大鼠39只，体重200±20g。适应性喂养2周后随机分为：对照组；25%CR组和45%CR组共3组，单笼饲养，自由摄水。记录对照组每日摄食量，并将此摄食量的75%和55%分别喂养25%CR和45%CR组大鼠。限食实验开始后每日给予阴道涂片观察动情周期变化并记录食物摄入量，每周监测体重变化一次。在实验开始后第1，4，7，10周分别取血一次监测血清胰岛素样生长因子（IGF-1）及性激素（雌激素，黄体生成素，卵泡刺激素）和的变化。实验第10周处死大鼠，取卵巢组织进行切片（每张

4、切片之间至少间隔200µm），苏木精-伊红染色观察各级卵泡并计数：从卵巢最大切面往两边依次选取7张组织切片用于HE染色，计数每张卵巢组织切片上各级卵泡数量，计算7张切片上卵泡总数和各级卵泡数量占卵泡总数的百分比例。所有数据以X±SEM表示，组间比较用方差分析和卡方检验。免疫组化染色观察胰岛素样生长因子-1在卵巢组织中的表达与定位。结果：1）在实验过程中对照组大鼠体重持续明显上升，25%CR组大鼠体重仅有小幅上升，45%CR组大鼠体重则出现了小幅下降。在实验第2周时45%CR组体重与对照组比较已经出现明显差异（210.17±6.18gVS188.73±3.10g，p<0.05）。在实验第3

5、周时25%CR组体重与对照组比较也有了显著差异（230.00±7.38gVS205.42±3.38g，p<0.05）。2）动情周期的监测结果为：对照组大鼠整个实验过程中都表现为规则的动情。25%CR组大鼠有25%动情周期不规则，主要表现在动情周期的延长，平均为7.8±0.6天，45%CR组有60%动情周期不规则，主要表现在动情周期的延长，也有个别大鼠表现为持续动情（最长持续动情23天）。I汕头大学医学院硕士学位论文3）血清免疫学实验提示IGF-1水平随着能量摄入的减少而不断下降。45%CR组大鼠在实验第7周时血清IGF-1水平(8.54±0.56μg/L)较第1周(12.26±0.57μ

6、g/L)已经开始出现明显的下降（p<0.05），而25%CR组大鼠至实验第10周时才出现显著差异(9.69±0.79μg/LVS12.23±0.82μg/L，P<0.05）。能量摄入的减少使雌激素水平下降，但是卵泡刺激素与黄体生成素并没有因为雌激素的下降反射性的升高。雌激素，黄体生成素和卵泡刺激素均呈下降趋势。4）组织学分析提示了25%及45%组的大鼠卵巢相对于对照组有更多的原始卵泡（97.92±9.06；129.4±7.79VS39.33±3.28，P<0.05）和更多的存活卵泡（219.58±15.31；234.80±12.53VS154.83±8.05，P<0.05）。免疫组化提示

7、IGF-1主要在存活的卵母细胞的胞浆中表达。结论：能量限制能够通过降低IGF-1水平抑制下丘脑-垂体-卵巢这一生殖轴，抑制FSH，LH及ESG的合成分泌，抑制原始卵泡的发育启动来减少卵泡的消耗，保留更多的原始卵泡，增加卵泡的储备以延长雌性大鼠生殖寿命，提高雌性大鼠的生殖潜能。关键词：能量限制；生殖寿命；IGF-1；卵巢；卵泡发育II汕头大学医学院硕士学位论文ABSTRACTObjective:Toinvestigatetheeffe