快速老化小鼠耳蜗ngf的表达分布和增龄性变化、以及pcdna3-β-ngf的构建

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1、分类号：R764.43+6学校代码：10601密级：公开编号：Y0902121硕士学位论文快速老化小鼠耳蜗NGF的表达分布和增龄性变化、以及pcDNA3-β-NGF的构建学科专业:外科学研究方向:耳聋的基础与临床研究生姓名:王永宝学号:Y0902121学位类型科学学位导师姓名:刘强和教授二O一二年五月独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我

2、一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日----------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊（光盘版）电子杂志社、中国科学技术

3、信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日目录快速老化小鼠耳蜗NGF的表达分布和增龄性变化、以及pcDNA3-β-NGF的构建………………………………………………….1中文摘要..………………………………………………………………..1ABSTRACT……………………………………………………………...4英汉缩略词表.…………………………………………………………...7前言………………………

4、………………………………………………81材料与方法.…………………………………………………….........111.1实验材料与仪器..…………………………………………………...111.2实验试剂...…………………………………………………………..111.3实验方法…………………………………………………………….122结果…………………………………………………………………..152.1NGF在小鼠耳蜗中的表达分布、年龄相关性变化及真核表达载体构建............................................................

5、..……………………………152.2各组小鼠耳蜗SGNsNGF及毛细胞NGF免疫组化平均光密度值..………………………………………………………………..162.3各组小鼠中轴位耳蜗石蜡切片螺旋神经节细胞NGF免疫组化染色观察结果………………………………………………………….162.4各组小鼠中轴位耳蜗石蜡切片毛细胞NGF免疫组化染色观察结果…………………………………………………………………172.5琼脂糖电泳检测结果………………………………………………172.6RT-PCR结果………………………………………………………..182.7胶回收目的基因产物结果……………………

6、…………………….182.8蓝白斑筛选结果…………………………………………………….192.9重组质粒pcDNA3-β-NGF经限制性内切酶HindIII和XhoI双酶切后电泳检测及测序结果………………………………………………..193讨论…………………………………………………………………243.1NGF在快速老化小鼠耳蜗中的表达分布、年龄相关性变化.......243.2NGF的营养作用…………………………………………………..253.3真核表达载体pcDNA3-β-NGF的构建................................264结论……………………

7、……………………………………………28参考文献………………………………………………………………..29综述……………………………………………………………………..34攻读学位期间发表的学术论文目录………………………………….41致谢…………………………………………………………………….42快速老化小鼠耳蜗NGF的表达分布和增龄性变化、以及pcDNA3-β-NGF的构建中文摘要目的：研究神经生长因子（nervegrowthfactor,NGF）在小鼠耳蜗中的表达分布、以及年龄相关性变化特点，构建真核表达载体pcDNA3-β-NGF，为老年性