壳寡糖促外周神经损伤修复及作用机制初探

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3、一部分壳寡糖促坐骨神经损伤修复作用的研究方法：1．制备大鼠坐骨神经损伤模型：SD大鼠40只，雌雄各半，行左侧坐骨神经夹伤术。术后，随机分为4组：壳寡糖低、高剂量组(剂量分别为：3、6mg／kg)，弥可保组(阳性对照，剂量为：130“g／kg)，及对照组(给予等体积的生理盐水)。腹腔注射给药，每天一次，共21天。2．检测大鼠术后4、8、12、16天热刺激撤回反射(WRL)。3．分别于术后8、12、16、20天行足迹实验，计算坐骨神经功能指数(SFI)。4．术后2l天，所有大鼠行电生理学检测。记录复合肌动作电位(CMAPs)

4、，计算CMAPs恢复指数(recoveryindex)。5．术后21天，每组随机选取2只大鼠，处死后取损伤段坐骨神经，固定、包埋和电镜观察再生有髓神经纤维直径和髓鞘厚度。6．术后2l天，剩余各组大鼠经灌流固定，取双侧腓肠肌，计算腓肠肌湿重比；损伤侧腓肠肌，进行石蜡包埋、切片，HE染色后测定肌纤维横截面积(CSA)。7．取损伤段坐骨神经，行NF．200免疫组织化学染色，检测再生神经纤维形态和再生神经纤维数。结果：‘1．WRL结果显示：4组所有大鼠在术后第4天，WRL值之间没有显著性差异(尸>0．05)。壳寡糖高剂量组在术后

5、的第8、12天的WRL值显著低于对照组(PO．05)。壳寡糖低、高剂量组在术后第16、20天的SFI值均显著高于对照组(尸<0．05)。中文摘要壳寡糖促外周神经损伤修复及作用机制初探3．电生理学检测结果显示：壳寡糖高剂量组的大鼠坐骨神经夹伤处近侧段和远侧段的复合肌动作电位恢复指数均显著高于对照组(P<0．05)。4．腓肠肌湿重比结果显示：壳寡糖高剂量组的大鼠腓肠肌湿重比与对照组相比有显著性差异(尸

6、示：壳寡糖高剂量组的大鼠腓肠肌肌纤维CSA与对照组相比有显著性差异(P<0．05)。6．NF．200免疫组化结果显示：壳寡糖低、高剂量组大鼠坐骨神经损伤段平均再生神经纤维数显著高于对照组(P

7、培养，通过NF．H免疫荧光细胞化学法观察在不同浓度壳寡糖(O．05mg／ml、0．1mg／ml、0．2mg／m1)作用下植块培养的DRG和分离培养的DRG神经元生长情况。2．Westernblot方法检测不同浓度壳寡糖(0．05mg／ml、O．1mg／ml、0．2mg／m1)对DI埝神经元NF．H和GAP43蛋白表达的影响。结果：1．NF免疫组化结果显示：与对照组相比，中、高剂量壳寡糖(0．1mg／ml、0．2mg／m1)可以有效地促进DRG突起的生长(氏0．01)。2．壳寡糖对消化培养的DRG神经元突起生长的作用与其对

8、DRG生长作用相似。与对照组相比，0．2mg／ml剂量壳寡糖可以有效地促进DRG神经元突起的生长(氏O。05)。3．Westernblot检测结果显示：与对照组相比，O．2mg／ml高剂量壳寡糖组NF．H和GAP43的表达量显著增加(尸