内毒素血症小鼠肺组织中mirnas的表达变化及功能的初步研究

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1、分类号UDC硕士学位论文密级内毒素血症小鼠肺组织中miRNAs的表达变化及功能的初步研究ExpressionofmiRNAsoflungtissuesinendotoxemicmouseandprimaryresearchoftheirfunctions作者姓名：区丹敏学科专业：病理学与病理生理学学院(系、所)：基础医学院指导教师：肖献忠教授论文答辩日期鲨堕墨型答辩委员会主席型／巾妒中南大学2012年05月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中

2、特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：匿丑鱼圣日期：盘!牟上月兰日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位

3、论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。硕士学位论文中文摘要摘要目的检测内毒素血症小鼠肺组织中miRNAs的表达情况，初步探讨miRNAs在内毒素血症肺损伤中可能的作用。方法1．经腹腔注射大肠杆菌内毒素(8mg／kg)制备小鼠急性肺损伤模型，采用高通量miRNA芯片技术初步筛选出内毒素血症肺组织中差异表达的miRNAs。2．应用QRT-PCR技术检测经miRNA芯片初步筛选出的部分差异表达的miRNAs，以验证其表达是否和芯片结果一致。3．挑选出QRT-PCR验证结果与芯片结果一

4、致的miR．1949，研究不同时间及不同剂量LPS处理后RAW264．7细胞中miR-1949的表达情况。4．应用miRNA靶基因预测软件miRDB预测miR-1949的靶基因，从中选择几个靶基因，然后分别在组织及细胞水平检测LPS处理后这些靶基因的表达情况。结果1．经miRNA芯片检测发现，内毒素血症小鼠肺组织中共有17个miRNAs表达上调，9个miRNAs表达下调。2．经QRT-PCR验证，miR．1949、miR-223、miR．150表达与芯片结果一致，其中miR．1949、miR-223表达上调，m

5、iR-150表达下调。3．LPS处理后RAW264．7细胞中miR-1949的表达呈现时间及剂量依赖效应。4．对预测出的miR-1949的靶基因MAPK8、MAP2K1、SMEKlT硕士学位论文中文摘要进行检测，发现LPS处理后肺组织及RAW264．7细胞中SMEKl表达降低，MAPK8、MAP2K1没有明显改变。结论1．miR-1949在LPS处理后的小鼠肺组织及RAW264．7细胞中表达上调；2．miR．1949可能通过调控SMEKl的表达而在小鼠内毒素血症肺损伤中发挥作用。关键词miRNAs，内毒素血症，

6、肺损伤硕士学位论文英文摘要ABSTRACTObiectiveThisstudywasattemptedtodetectexpressionofmiRNAsoflungtissuesinendotoxemicmouseandinvestigatetheroleofmiRNAsagainstendotoxemia．Method1．AanimalmodelofacutelunginjurywaspreparedbyinjectionofE．colilipopolysaccharideintraperitoneally

7、,andhigh-throughputmiRNAarraytechnologywasusedtoscreenmiRNAsdifferentiallyexpressedinlungtissuesinendotoxemicmouse．2．QRT-PCRisusedtoredetectsomeofthesemiRNAstoverifyiftheexpressionofthesemiRNAsisconsistentwiththeresultofhigh—throughputmiRNAarray．3．Expression

8、ofmiR-1949wasdetectedinRAW264．7cellstreatedwithLPSfordifferenttimeandwithdifferentdosesofLPS．4．AsoftwareformiRANtargetgenemiRDB，wasusedtopredictthetargetgenesofmiR-1949，thenQRT-PCRwasusedtodetec