光动力疗法对牙周致病菌灭菌效果的研究

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1、复旦大学硕士学位论文光动力疗法对牙周致病菌灭菌效果的研究THESTUDYFORTHESTERILISATIONALEFFECTOFPHOTODYNAMICTHERAPYONPERIODONTALPATHOGENS院系:复旦大学附属华山医院专业:口腔临床医学姓名:蒋雪薇导师:俞立英教授指导小组成员:周艺,魏勋斌,阮斐怡目录中文摘要1英文摘要3缩略词表6■、广?—1—r-j刖§7第一部分外源性光动力疗法对牙周致病菌的灭菌效果111.1材料与方法121.2结果151.3讨论21第二部分内源性光动力疗法对牙周

2、致病菌的灭菌效果232.1材料与方法242.2结果272.3讨论33全文总结35:献36附录纖42聽49论文独创性声明和论文使用授权声明复旦大学硕士学位论文光动力疗法对牙周致病菌灭菌效果的研究中文摘要[目的]本课题旨在初步观察不同光剂量以及不同光敏剂浓度分别对产黑普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和伴放线放线杆菌的杀灭作用,以及探讨细菌内源性的光敏剂,选择具有最佳的杀灭效果的光剂量,从而为光动力学疗法(Photodynamictherapy,PDT)治疗牙周炎的临床应用提供理论和实验依据。[方法]1.外源性光敏剂

3、组,选用产黑普氏菌(Prevotellamelaninogenica,P.m),牙齿S卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis,P.g)和伴放线放线杆菌(Aggregatibacteractinomycetemcomitans,A.a)的标准菌株为实验菌株,选用甲苯胺蓝氧(Toluidineblue0,TB0)为光敏剂,采用自制Lffl便携式光源(红光光源,波长630nm,40mW/cm2)0实验中对无菌平板进行半遮光处理,未遮光部分为实验组,遮光部分为对照组。平板中加入含不同TB0浓度(产黑普氏菌

4、组TB0浓度分别为1“g/ml,2.5^g/ml,5^g/ml,7.5#g/ml,10pg/ml;牙龈卟啉单胞菌组TBO浓度分别为lOpg/ml,20^g/ml,30^g/ml,40^g/ml,50g/ml;伴放线放线杆菌组,TB0浓度分别为10g/ml,20"g/ml,30^g/ml,40^g/ml,50^g/ml)的培养基,将细菌铺板,采用红光光源对平板照射不同时间后(产黑普氏菌组光剂量分别采用1J/cm2,3J/cm2,9J/cm2;牙龈卟啉单胞菌组光剂量分别采用3J/cm2,9J/cm2,12J/cm2;伴放线

5、放线杆菌组光剂量分别采用3J/cm2,9J/cm2,12J/cm2),培养48-72h,对平板菌落进行计数,将所得数据采用标准化法及配对t检验进行统计学分析。2.内源性光敏剂组,选用产黑普氏菌,牙龈卟啉单胞菌和伴放线放线杆菌的标准菌株为实验菌株,采用自制LH)便携式光源(蓝光光源,波长415±10nra,功率40mW/cm2)。实验中对无菌平板进行半遮光处理,未遮光部分为实验组,遮光部分为对照组。平板中加入培养基,将细菌铺板,采用蓝光光源对平板照射不同时间后(产黑普氏菌组光剂量分别采用lOJ/cro2’20J/cm2,

6、30J/cm2,40J/cm2;牙龈卟啉单胞菌组光剂量分别采用10J/cra2,20J/cm2,30J/cm2,40J/cm2,50J/cm2;伴放线放线杆菌组光剂量分别采用10J/cm2,20J/cm2,30J/cm2,40J/cm2,50J/cm2),培养48-72h,对平板菌落进行计数,将所得数据采用标准化法及配对t检验进行统计学分析。复a大学硕士学位论文[结果]1.外源性光敏剂组,当光剂量为3J/cm2,TBO浓度为5ng/mL时,产黑普氏菌存活率最小,实验组与对照组存在显著性差异(P=0.01);当光剂量为9

7、J/cm2,TB0浓度为40yg/mL时,牙龈卟啉单胞菌存活率最小,实验组与对照组存在显著性差异(P=0.0005);当光剂量为9jA;m2,TB0浓度为40pg/mL时,伴放线放线杆菌存活率最小,实验组与对照组存在显著性差异(P=0.001);2.内源性光敏剂组,当光剂量为20J/cm2时,产黑普氏菌细菌存活率最小,实验组与对照组存在显著性差异(P〈0.05);当光剂量为20J/cm2时,牙龈卟啉单胞菌细菌存活率最小为70%,但P>0.5,实验组与对照组不存在显著性差异;当光剂量为40J/cm2时,伴放线放线杆菌细

8、菌存活率最小,实验组与对照组存在显著性差异(P=0.001)。[结论]1.初步获得了外源性光动力疗法对产黑普氏菌,牙龈卟啉单胞菌和伴放线放线杆菌的最佳灭菌效果的光剂量以及光敏剂浓度配伍。2.产黑普氏菌对外源性光动力疗法的敏感性高于牙龈卟啉单胞菌及伴放线放线杆菌。3.在不施加外源性光敏剂,仅依赖细菌的内源性光敏剂时,配合自制光源,内

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