醋酸铅诱导人肝细胞系l-02细胞凋亡及其与caspase-3表达关系的影响

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1、分类号：R575.5R114学校代码：10601密级：公开编号：0902065硕士学位论文醋酸铅诱导人肝细胞系L-02细胞凋亡及其与caspase-3表达关系的影响学科专业:内科学研究方向:化学性肝病研究生姓名:邢伟学号:0902065学位类型科学学位导师姓名:李胜联教授二O一二年四月独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一

2、同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日----------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊（光盘版）电子杂志社、

3、中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日II目录中文摘要………………………………………………………………1英文摘要……………………………………………………………2英汉缩略词对照表……………………………………………………………4前言……………………………………………………………………51材料与方法………………………………………………………81.1正常人肝细胞系……

4、………………………………………………………81.2主要实验仪器………………………………………………………………81.3主要实验试剂………………………………………………………………81.4主要实验材料………………………………………………………………91.5相关试剂的配制……………………………………………………………91.6实验方法….………………………………………………………………121.7统计学处理………………………………………………………………..142结果…………………………………………………………………142.1细胞生长形态学观察…………………………

5、…………………………202.2MTT比色实验………………………………………………………222.3Hoechst33258荧光染色法………………………………………………..162.4醋酸铅对L-02正常人肝细胞caspase-3mRNA的转录水平影响……...172.5醋酸铅对L-02正常人肝细胞caspase-3蛋白表达的影响……................183讨论………………………………………………………………….193.1铅的研究现状……………………………………………………………193.2细胞凋亡…………………………………………………………………

6、.193.3铅与细胞凋亡……………………………………………………………..193.4本实验结果………………………………………………………………..203.5本研究的临床意义………………………………………………………..203.6研究展望…………………………………………………………………..214结论…………………………………………………………………22参考文献………………………………………………………………23综述……………………………………………………………………………27攻读学位期间发表的学术论文目录…………………………………………37致谢………………

7、……………………………………………………………38II醋酸铅诱导人肝细胞系L-02细胞凋亡及其与caspase-3表达关系的影响中文摘要目的：探讨醋酸铅诱导人肝细胞系L-02细胞凋亡及其与caspase-3表达关系的影响。方法：不同浓度(0、2.5、40、100、200、400μmol/L)的醋酸铅处理生长良好的L-02细胞24h及(或)48h后，MTT法观察L-02细胞生长的影响，Hochest33258染色法观察细胞凋亡形态学变化，RT-PCR和WesternBlot法观察caspase-3的表达。结果：醋酸铅作用24h及48h后与对照组比较，能明显抑

8、制细胞的增殖(24h0.4678±0.0438，0.4686±0.