贝伐单抗对去上皮瓣epi-lasik术后兔眼角膜haze形成以及对tgf-β1、α-sma表达的影响

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1、湖北中医药大学硕士学位论文贝伐单抗对去上皮瓣Epi--LASIK术后兔眼角膜Haze形成以及对TGF--β1、α--SMA表达的影响姓名：李婧申请学位级别：硕士专业：中西医结合临床指导教师：沈政伟20120520中文摘要目的：本实验探讨贝伐单抗(Bevacizumab)是否对兔去上皮瓣准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术(Off-flapepipoliSlaserinsitukeratomileusis，Off-flapEpi-LASIK)术后角膜术区转化生长因子一D1(Transforminggrownfacter-D1，TGF-D1)和O【一平滑肌肌动蛋白(0【

2、-smoothmuscleactin，。【-SMA)的表达产生影响，是否对角膜上皮下混浊(Haze)形成产生影响。方法：健康的成年普通级青紫兰兔26只，雌雄兼用，体重2．5～3．Okg，分成4组，随机选取其中2只作为空白对照组，其余24只兔均行Off-flapEpi-LASIK手术，术后随机分为三组，每组8只(16眼)，术后即给予结膜下注射Bevacizumab2．5mg(O．1mL)为治疗组，分别于术后和术后4天给予两次结膜下注射Bevacizumab2．5mg(O．1mL)治疗的为加强组，于术后给予0．1ml生理盐水处理为对照组；术后裂隙灯显微镜观察角膜

3、haze程度并记录，分别于1周、4周时取兔眼角膜，部分行HE染色和PAS染色观察组织病理变化，另一部分用于免疫组织化学研究，检测TGF-D1、o【-SMA在角膜组织中的表达。结果：1、行Off-flapEpi-LASIK手术后，三组角膜上皮均于术后4～5d完全愈合，经统计学分析差异无显著性(P>0．05)；2、术后1周后，对照组Haze最明显，均值为1．25，均比经Bevacizumab治疗的治疗组(均值0．75)和加强组(均值0．66)Haze均值高，经统计学分析比较差异均有显著意义(PO．05

4、)；术后4周结果相似；3、术后1周，对照组中央角膜上皮细胞增生，浅基质层成纤维细胞数量多，呈活跃增殖状态，纤维排列紊乱，炎症细胞游走；治疗组和加强组角膜中央上皮细胞较规则，浅基质层见一定量成纤维细胞，纤维排列较整齐；术后4周，治疗组和加强组组织结构趋于正常，而对照组中央角膜上皮细胞增生明显，基底细胞大小不一，未见明显柱状结构，浅基质层成纤维细胞数量明显增多，功能活跃，胶原纤维增生、排列紊乱明显，纤维间隙较大，明显多于治疗组和加强组。4、术后1、4周，对照组术区角膜基质层TGF-D1、O【-SMA的表达均较治疗组和加强组高(P<0．01)；治疗组术区角膜基质层

5、TGF-p1、o【-SMA的表达较加强组高(P<0．01)；5、对照组基底膜在术后1周和4周均未见完整、连续；术后1周，治疗组和加强组见基底膜基本完整和连续，术后4周，两组基底膜均更清晰，更完整、更连续，与正常对照组相同。结论：1、Off-flapEpi-LASIK术后早期角膜基质内成纤维细胞活化增殖，新生胶原纤维排列紊乱，角膜Haze形成；2、Bevacizumab对Off-flapEpi-LASIK术后角膜上皮早期愈合没有明显抑制作用；3、Bevacizumab能减少Off-flapEpi—LASIK术后兔眼早期角膜TGF—D1和0【一SMA表达水平，从

6、而抑制角膜Haze形成；4、Bevacizumab能促进上皮细胞基底层恢复，形成一个天然的物理屏障，抑制成纤维细胞增殖、转化，降低纤维化反应，从而减少角膜Haze生成，保持角膜透明性。5、Bevacizumab减少Off-flapEpi-LASIK术后兔眼早期角膜基质层TGF-D1和O【-SMA表达水平，抑制角膜Haze形成机制再探讨。鉴于Bevacizumab安全性和有效性的考虑，有望成为预防和早期治疗角膜表面屈光手术术后角膜Haze的理想药物。关键词：去上皮瓣微型角膜刀法角膜上皮瓣下原位磨镶术；贝伐单抗；角膜上皮下混浊；基底膜；转化生长因子一D1；0【一

7、平滑肌肌动蛋白InhibitionofTGF-131anda-SMAexpressionbyBevacizumabforpreventinghazeafterOff—fapEpi—LASKSpeciality：ClinicalDisciplineofChineseandWesternIntegrativeMediCineAuthor：JingLiTutor：ZhengweiShenAbstractPurpose：ToinvestigatetheeffectofsubconjunctivalinjectionsofBevacizumab，anantiVEGFa

8、ntibody，ontheinhibitionofc