峨参提取物抗肿瘤活性的初步研究

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1、西南交通大学硕士学位论文峨参提取物抗肿瘤活性的初步研究姓名：涂显琴申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：马超英20120425西南交通大学硕士研究生学位论文第l页摘要目的：在体外初步探讨峨参提取物对人非小细胞肺癌A549和H460细胞增殖的抑制作用，为峨参提取物治疗非小细胞肺癌提供理论和实验依据。在体内从峨参石油醚提取物及水煎剂对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤重量、体积、形态学变化及b觚、bCl．2等因子的表达等各方面综合分析峨参石油醚提取物及水煎剂对H22荷瘤小鼠的影响，旨在为峨参应用于肿瘤的临床治疗提供理论依据。方法：(1)以A549和H460细

2、胞为细胞模型，采用MTT法检测不同浓度不同时间点(24小时、48小时)峨参提取物对A549和H460细胞增殖的抑制作用，计算峨参石油醚提取物对肺癌细胞生长的抑制率与半数抑制浓度IC50。(2)采用DAPI染色法、琼脂糖凝胶电泳法(DNAladder法)检测峨参石油醚提取物对非小细胞肺癌A549和H460凋亡形态学特征。(3)采用小鼠腹水型肝癌细胞株H22于小鼠左腋接种，建立小鼠移植肿瘤模型后，将小鼠随机分为6组，以环磷酰胺(CTX)为阳性对照，O．5％CMC-Na为模型组，增设峨参水煎剂组，每日给药1次，每隔2天记录一次体重。14天后，每组处理

3、7只小鼠，取出肿瘤组织、胸腺及脾脏，称重，计算动物死亡率、抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数及药物对小鼠的生命延长率。采用HE及免疫组化法检测肿瘤组织的坏死情况及组织中bcl．2及b觚的表达情况。结果：(1)峨参氯仿、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物对A549和H460细胞的增殖均有抑制作用，除正丁醇外，另三个溶剂提取物在药物浓度为lOu咖l左右时，细胞死亡率均达50％以上。(2)峨参石油醚提取物处理A549和H460细胞24小时后，其IC50值分别为6．13Ilg／ml和0．97Ilg／ml。(3)肺癌细胞在一定浓度峨参石油醚提取物作用下，24小时和4

4、8小时后细胞出现明显的凋亡形态变化，包括细胞皱缩、出泡、细胞核碎裂、固缩、细胞骨架解体等，其中细胞核碎裂最为明显，且48小时内随着时间的延长凋亡越加明显，而0．1％DMSO的对照组细胞完整，并未出现以上现象。(4)DNAladdcr可观察到梯状的DNA凋亡电泳带。(5)峨参石油醚提取物高、低剂量组、峨参水煎剂组和C1’X组对H22小鼠肝癌实体瘤的抑制率分别为60．80％、68．29％、62．56％、71．52％：对小鼠的生命延长率分别为21．2％、49．5％、68．8％、40．6％；胸腺指数分别为2．05±O．34、2．24±O．39、2．23

5、±O．4l、1．86±O．57，除CTX组外，其余药物组与模型组1．43±O．19比较p

6、植瘤的增长，减小肿瘤质量，延长小鼠的生存期，其促进细胞凋亡的机制可能是通过促进bax的表达，抑制bcl．2的表达实现的。峨参提取物在治疗肿瘤上表现出一定疗效，有望开发成治疗肿瘤的药物。关键词：峨参：提取物：细胞凋亡；肺癌；肝癌西南交通大学硕士研究生学位论文第1II页AbstractPurpose：Thisstudyw舔t0inVestigate也ee仃．ectoftlleextractsof彳”历，．括c搬移叮v甜fr括仁．夕鳓oniIlllibitingproliferationofnon-smallcellluIlgc锄cer(NSCLC)

7、A549锄dH460iIlvi仃0，t11eno疏rtlle妇sis觚dexpe曲1entproofsforcuringNSCLCby恤ex们ctsof爿"，加括c姗点咖Ps驴捃仁．夕月幼锄．InViVo，iIlordert0invest追atemeefrectoftIleextraCtsofAn衄scussylvestris(L-)Ho‰onH22iIlmice，we如lly粕alysistlletuIllorVol啪e，wei曲t'mo印hologychallge锄dtlleexpressionofb馘锄dbcl-2，tlleno疏rtll

8、esisproofsforc嘶ngt11etumorby彳刀f加括c淞砂，蚀s护括仁．夕H2纾锄．Methods：1．Accordingtotllec