yc-1改善乏氧增强人肺腺癌a549细胞放射敏感性的体外研究

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1、徐州医学院硕士学位论文YC--1改善乏氧增强人肺腺癌A549细胞放射敏感性的体外研究姓名：陈钦申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：蒋晓东2012-04徐州医学院硕士学位论文YC一1改善乏氧增强人肺腺癌A549细胞放射敏感性的体外实验研究中文摘要目的探讨YC．1(3．(5’．羟甲基一2’．呋喃基)．1．苯甲基吲唑)对乏氧人肺腺癌A549细胞的放射增敏作用。方法以人肺腺癌A549细胞为实验对象，以CoCl2构造乏氧模型。①噻唑蓝比色法(MTT法)检测不同浓度的YC．1在不同的孵育时间对细胞增殖活性的影响，

2、以及YC．1在常氧与乏氧下对细胞作用24h的20％药物抑制浓度(IC20)。②A549细胞分为常氧对照组(PBS组)、乏氧对照组(150啪ol／lCoCl2)、乏氧+YC．1组(150uIIlo们CoCl2+50啪。坍YC．1)，继续培养24h后，行不同剂量的X线照射(O、2、4、6、8GY)，克隆形成实验计算细胞存活分数，多靶单击模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比。③A549细胞分为常氧组和对照组，每组又分为4个亚组：对照组、单照组、YC．1组和联合组(YC．1+照射)，继续培养24h后，流式细胞仪检

3、测细胞凋亡。④A549细胞分为常氧组和对照组，每组又分为3个亚组：对照组、单照组和联合组(YC．1+照射)，继续培养24h后，流式细胞仪检测细胞周期分布。结果①YC．1对A549细胞有增殖抑制作用，在一定浓度范围内呈时间．剂量依赖性，在常氧和乏氧培养24h下IC20分别为18．67岬。儿和39．45岬。儿。②乏氧对照组和乏氧+YC-1组Do和Dq值分别为(2．1997、1．7960)和(1．9885、1．4239)。三组的SF2分别为0．529l、O．7564和0．6136。联合组的SE‰=1．106，S

4、ERD口=1．26l。③常氧下，四组的凋亡率分别为(2．55士0．14)％，(24．44士O．62)％，(2．31土0．12)％和(24．7士1．3)％；单照组与联合组间无差异(尸=0．674)。乏氧下，四组的凋亡率分别为(2．95士0．37)％，(15．44土0．96)％，(3．09士O．32)％和(30．17士1．22)％，单照组与联合组间的凋亡率有差异(P=O．ooO)。④常氧培养下，各组间的G2／M期细胞比例不同(F=31．33，尸=0．001)，单照组与联合组间无统计学差异徐州医学院硕士学位论文

5、(尸叼．39)。但是在乏氧下，单照组与联合组间有统计学差异(．P=0．000)。结论YC．1对A549细胞有增殖抑制作用，在一定浓度范围内呈时间．剂量依赖性。YC．1对乏氧的A549细胞有放射增敏作用。常氧培养下，YC．1联合放射无促细胞凋亡作用，并不能使细胞周期发生G2／M期阻滞，无放射增敏作用。乏氧培养下，YC．1联合放射对A549细胞有促凋亡作用并使其发生G2／M期阻滞，且有放射增敏作用。关键词3．(5’．羟甲基．2’一呋喃基)．1．苯甲基吲唑；乏氧；放射增敏：A549细胞系徐州医学院硕士学位论文Y

6、C一1impI’oVehypoxiaandenhancetheradiosensitiVeef．fectofadenocarcinomaA549celllineinvitroAbstractObjec咖eToinveStigate此r枷osensiti、，ee位CtsofYC一1onho曲ca(1eIlocarcinomaA549ceUlirle．M“hods①A549cellswereincubated谢tllYC．1ofvariousconCen仃ationsfordi毹rentdurationsun

7、dernomoxiaaIldhypox地respectiVely．1kIC20ofYC-1wausdetenIlinedbyMTTassay．②A549cellsweredivided硫ono姗oxiccon的lgroup(仃eated、耐mPBS)，hypoxiccon仃Dlgroup(150umo儿CoCl2)aIldYC-1+hypoxiagroup(150umo儿CoCl2+50啪。儿YC一1)，respectiVely．ARer24h，me缸eegroupsu11derwent11i曲-ener

8、

9、盯X-ra【yirradiation、杭廿lV撕ousdosesincluding0，2，4，6and8Gy．111e删试胁ionofA549cellsineachgroupunderdi虢remconditionswaSdetectedbyclonogeIlicassay，andt11emealllethaldose(Do)，quaSi-t11I．esholddose(Dq)，exlrapolationmmlber(N)，