s1p联合大鼠骨骼肌成肌细胞对新生大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的影响

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1、南昌大学硕士学位论文S1P联合大鼠骨骼肌成肌细胞对新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响姓名：张普华申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：谷翔201206中文摘要目的：探讨1．磷酸神经鞘氨醇(SIP)联合大鼠骨骼肌成肌细胞对新生大鼠心肌细胞缺氧／复氧后细胞损伤的影响。方法：1．分离新生1．3d的大鼠心室肌细胞、复苏大鼠骨骼肌成肌细胞株，分别行新生大鼠心肌细胞原代培养(H组)、大鼠骨骼肌成肌细胞培养(L6组)及两种细胞共同培养(H+L6组)，通过台盼蓝染色细胞计数法，绘制不同时间段细胞生长曲线，以观察各组细胞生长情况。2．在新生大鼠心肌细胞A／R损伤模型中，通过对心肌细胞复氧4h后即

2、时(R4h)、1d及2d的噻唑蓝(MTT)检测，探索各时间段SIP对新生大鼠心肌细胞缺氧／复氧作用的最佳浓度。3．以最佳浓度SlP加入共同培养细胞(S+H+L6组)，分别对H+L6组、S+H+L6组实施缺氧2h／复氧4h干预，通过比较两组吸光值(OD值)、乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)等指标在A／R各时间段差异，探讨S1P联合骨骼肌成肌细胞对新生大鼠心肌细胞缺氧／复氧后细胞损伤的影响。结果：1．细胞培养结果：新生大鼠心肌细胞在培养24h后开始贴壁生长，培养6d内细胞数量未见明显变化，培养2d后可见细胞搏动：骨骼肌成肌细胞在培养6d内细胞数增长明显，未见细胞搏动；心肌细胞及骨

3、骼肌成肌细胞在共同培养6d内细胞总数增长较快，可见部分搏动细胞。2．SIP对心肌保护的有最佳浓度：在H组A／R损伤模型中，通过对活细胞数检测显示，与对照组相比(H组中不加S1P)，实验组(H组中加S1P)SIP为1I．tM浓度时，均可明显减少各时间段(R4h、ld、2d)A／R对心肌细胞的损伤(P<0．05)。3．S1P联合骨骼肌成肌细胞对A／R大鼠心肌细胞保护作用：对H+L6组、中文摘要结论：S+H+L6组实施A2h／R4h干预后，分别检测两组R4h、ld、2d时的OD值、LDH和MDA，结果显示：S+H+L6组(S1PlptM)的OD值明显高于H+L6组(P<0．05)，LDH

4、和MDA含量要明显低于H+L6组(P

5、genation．Methods：1．Primaryculturedofcardiacmyocytesfromventriclesof1st—to-3rd-day—oldSpragueDawley(SD)rats，andculturedratskeletalmyoblastscell，separatetoseveralgroups：cardiacmyocytes(Hgroup)，skeletalmyoblasts(L6group)andtwoCO-culturedgroup(H+L6group)．CountedcellsandmadethecellgrowthCUrVe．2．ByM

6、TTassay,toexploretheeffectiveconcentrationofS1PoncardiacmyocytesA／Rinjurymodelonthevarioustimepoints(reoxygenation4h(R4h)，ldand2d)．3．Separatedtotwogroups：plusS1P(S+H+L6group)andcontrolgroup(H+L6group)ByMTT,LDHandMDAassaytoexploretheeffectsofS1PcombinesskeletalmyoblastsonA／Rinjurycardiomyocytes

7、modelondifferenttime．Resuit：1．Cellcultureresults：neonatalratcardiacmyocytesbegantoadhereafter24h．During6days，nosignificantchangeoncellnumber．After48hbegantoseecellbeating；thenumberofskeletalmyoblastsincreasedsignificantlywithin6d，andnoc