il-31在哮喘小鼠肺组织中的表达及对肺组织细胞分泌ck的影响

《il-31在哮喘小鼠肺组织中的表达及对肺组织细胞分泌ck的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、遵义医学院硕士学位论文IL--31在哮喘小鼠肺组织中的表达及对肺组织细胞分泌CK的影响姓名：杜青波申请学位级别：硕士专业：免疫学指导教师：黄俊琼201205遵义医学院硕士学位论文IL．31在哮喘小鼠肺组织中的表达及对肺组织细胞分泌CK的影响IL一31在哮喘小鼠肺组织中的表达及对肺组织细胞分泌CK的影响摘要目的本实验通过研究IL．31和IL．31R在哮喘小鼠肺组织中的表达及趋化因子在hIL．31作用肺泡上皮细胞后的分泌情况，进一步探讨IL．31在哮喘气道炎症中的作用。方法1)采用卵白蛋白(OVA)致

2、敏，激发的方法建立哮喘小鼠模型，将20只雌性BABL／C小鼠随机分为A(对照组)和B(哮喘模型组)两组，每组各10只。第一阶段为致敏阶段，分别在第l天和第14天腹腔注射0．2ml的100pgOVA(Ovalbumin)和2．25mg氢氧化铝凝胶(其浓度为13mg／m1)混悬液各1次；从第21天气开始雾化吸入浓度为3％OVA，每次30min，连续7天，此阶段为模型的激发阶段：正常对照组小鼠，在致敏和激发两个阶段用PBS代替OVA进行。2)制作病理切片：完成致敏、激发后的模型小鼠，在结束激发后的24小

3、时内，无菌取肺组织，部分组织制作病理切片(HE染色)，观察两组小鼠气道组织结构病理改变情况；部分组织提取总RNA，用于以后的实验。3)hIL一31作用A549细胞：用含15％胎牛血清的RPMIl640于37"C、5％C02的环境下培养A549细胞。当细胞铺满瓶底的85％～95％时，用不同浓度(10ng／ml、50ng／ml、lOOng／m1)hIL一31作用A549细胞和相同浓度(10ng／m1)hIL一31作用A549细胞不同时间(12小时、24小时、36小时)。4)用荧光定量PCR(FQ-PC

4、R)方法检测两组小鼠肺组织IL．31及IL．31R的水平及趋化因子CCL2在hlL一31作用A549细胞后的分泌情况。统计学处理以SPSSl7．0软件进行统计分析，数据以均数±标准差表示，两组间的样本均数用t检验。本研究设定检验水准a=O．05，以P<0．05为差异有统计学意义。结果1)观察哮喘组小鼠在雾化10分钟左右可见鼻翼煽动增快，每分钟可达350次遵义医学院硕士学位论文IL．31在哮喘小鼠肺组织中的表达及对肺组织细胞分泌CK的影响左右，烦躁不安，嘴唇颜色加重，躯体呈弓背向上等症状。对照组小鼠

5、未见明显异常。2)病理切片显示：哮喘小鼠急性发作时，在支气管及血管周围有中性粒细胞和嗜酸性粒细胞浸润；细胞结构破坏、骨架断裂；胸腔压力增大、肺泡破裂。3)荧光定量PCR的相对表达结果显示：和正常对照组相比较，IL．31及IL．31R在哮喘小鼠急性发作时肺组织的表达增高，P<0．05，差异有意义。4)不同浓度hlL．3l作用于A549细胞后，每组浓度与未处理组相比较，趋化因子CCL2的分泌均增高。P<0．05，差异有意义。5)同一浓度hlL．31作用A549细胞，CCL2在不同时间段分泌均增高。P<

6、0．05，差异有意义。结论荧光定量PCR检测发现，IL．31及IL．31R在哮喘小鼠在肺组织中表达增高，说明IL．31在哮喘的发病机制中发挥作用；hlL．31作用于肺组织来源的A549细胞后，趋化因子CCL2的分泌增多，说明，IL．31可能诱导肺组织细胞分泌趋化因子参与哮喘气道炎症。这一结论为哮喘气道炎症的形成提供更直接的证据。关键词白介素．31：A549细胞；嗜酸性粒细胞：CCL2遵义医学院硕士学位论文IL．3l在哮喘小鼠肺组织中的表达及对肺组织细胞分泌CK的影响ExpressionofInte

7、rkin-31inthelungtissueoftheasthmaticmiceandThesecretionsofCKfromlungtissuecellsobjectivesAbstractByresearchedtheIL--31andIL·-31Rexpressioninthelungofasthmaticmiceandche—motacticfactorsecretedbystudiesofalveolarepithelialcellswithhlL一31．Furtherinvestig

8、atetherelationshipbetweenIL-31andc11romcairwayinflammationofasthma．Methods1)TheBALB／Cmicemodelwassensitizedandinducedbyovalbumin(OVA)withclassicmethod．Twentyasthmaticfemalemicewererandomlydividedintotwogroups(tenineach)：normalcontrolgroupandas