ginsenoside rb1抑制由单纯疱疹病毒1型感染导致的人神经胶质瘤细胞增殖和凋亡异常

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1、青岛大学硕士学位论文GinsenosideRb1抑制由单纯疱疹病毒1型感染导致的人神经胶质瘤细胞增殖和凋亡异常姓名：梁园园申请学位级别：硕士专业：病原生物学指导教师：王斌20120528GinsenosideRbl抑制由单纯疱疹病毒1型感染导致的人神经胶质瘤细胞增殖和凋亡异常摘要目的：l建立人单纯疱疹病毒I型(Herpessimplexvirus，HSV-1)感染人星形胶质瘤细胞U251的模型。明确GinsenosideRbl(GRbl)对HSV-1感染导致的U251凋亡异常的干预效果并确定有效的药物浓度；2研究GRb

2、l对HSV-1感染导致的U251细胞神经营养素家族表达异常的抑制作用。材料和方法：1以MOI(multiplicityofinfection)等于5的HSV-1感染U251细胞建立感染模型。设立GRbl组、GRbl+HSV-1组、HSV-1组和对照组，倒置显微镜观察细胞形态学改变。采用MTT比色法检测HSV-1感染后U251细胞增殖的变化；GuavaNexin@Reagent试剂盒流式细胞术检测U251细胞凋亡比率的变化。2设立GRbl(400btg／m1)组、GRbl+HSV-1(4001ag／m1)组、HSV-1组

3、和对照组，RT-PCR方法检测感染6h、12h、24h、36h和48h后GRbl(4001tg／m1)、GRbl+HSV-1(400ltg／m1)组、HSV-1组和对照组NGFmRNA和BDNFmRNA的表达情况。Westernblot方法检测12h、24h、36h和48h后各组NGF的蛋白表达情况。结果：1MTT法结果显示HSV-1组M丌值始终低于对照组俨

4、TT值均高于HSV-1组(P<0．05)。对照组形态学观察HSV-1组细胞感染12h后开始出现融合，24h融合增多，36h后出现细胞病变效应(CPE)，GRbl+HSV-I(4001ag／m1)组细胞感染24h后开始出现少量融合，36h后融合增多，但大部分细胞为正常形态；流式细胞术显示：GRbl+HSV-1(4001．tg／m1)组凋亡率在各时间段均低于HSV-1组(P<0．05)。2RT-PCR结果显示：GRbl(4001xg／m1)组和ORbl+HSV-1(4001xg／m1)组在感染HSV-1早期6h．12hNG

5、FmRNA表达降低妒

6、致U251细胞的凋亡。3400lag／ml的GRbl能够抑制HSV-1感染导致U251细胞NGF的表达异常。硕士研究生梁园园(病原生物学)指导教师王斌教授关键词：人单纯疱疹病毒I型；GinsenosideRbl1人星形胶质瘤细胞；细胞凋亡；神经生长因子；脑源性神经生长因子课题来源：国家自然科学基金支持(30770105，81070501)；青岛市科技局资助项目(08一卜3—30一jch)山东省“病原生物学”泰山学者工程资助项目Ⅲ2洲2㈣5删7⋯8川0㈣2洲YInhibitoryEffectsofGinsenosideR

7、blonAbnormalChangesofProliferationandApoptosiscausedbyHSV-1inHumanGiiomaCellsAbstractobjective：1ToestablishallHerpessimplexvirus-1(HSV-1)infectionmodelofhumangliomacells(U251)invitroandinvestigatetheinhibitoryeffectsofGinsenosideRbl(GRb1)onapoptosiscausedbyHSV-1

8、inU251．2Toinvestigatetheinhibitorye仃ectsofGRblonNeurotrophinsexpressioninU251cellscausedbyHSV-1infection．Materialsandmethods：1U251cellswereinfeCtedbyHSV-1atamultiplic