genistein抑制由hsv1感染导致的人星形胶质瘤细胞增殖和凋亡异

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1、青岛大学硕士学位论文Genistein抑制由HSV--1感染导致的人星形胶质瘤细胞增殖和凋亡异常姓名：王倩申请学位级别：硕士专业：人体解剖与组织胚胎学指导教师：于向民20110529Genistein抑制由HSV-1感染导致的人星形胶质瘤细胞增殖和凋亡异常摘要目的：l建立人单纯疱疹病毒I型(Herpessimplexvirus，HSV-1)感染人星形胶质瘤细胞U251模型。研究HSV-1感染对U251细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。2研究Genistein(GST)对HSV-1感染导致的U251细胞增殖和凋亡异常的抑制作用。

2、材料和方法：l以MOI(multiplicityofinfection)为5的HSV-1感染U251细胞，观察细胞形态学的改变。MTr比色法检测HSV-1感染后U251细胞增殖的变化；GuavaNexin@Reagent试剂盒流式细胞术检测细胞凋亡比率的变化；PI染色流式细胞仪检测细胞周期的变化。2设立GST组、GST+HSV-1组、HSV-1组和对照组，采用形态学观察、MTT比色法检测HSV-1感染后U251细胞增殖的变化。GuavaNexin@Reagent试剂盒流式细胞术和RT-PCR方法分别检测感染12h、24h和3

3、6h后GST(1599／m1)组、GST+HSV-1(151xg／m1)组、HSV-1组和对照组U251细胞凋亡比率的变化和gDmRNA的表达情况。飞结果：1对照组U251细胞胞体细长，突起延展充分，HSV-1组U251细胞在感染24h后出现细胞融合；48h后出现细胞病变效应。MTT法结果显示HSV-1组OD值始终低于对照组(尸

4、S期细胞始终高于对照组(P<0．05)；Go／Gl期细胞低于对照组(P<0．05)。24h后，G2／M期细胞比率开始高于对照组(P<0．05)。2MTT比色法结果显示处理组之间的差别具有高度统计学意义(严510．743，P<0．05)，并有明显的时间效应(，=2243．2，P

5、少量融合；36h后融合增多，但多数细胞仍为正常形态。AnnexinV／7．AAD双染流式细胞术结果显示处理组之间的差别具有高度统计学意义(，=1788．58，P

6、细胞周期的异常。3GST能够抑制HSV-1感染所致的U251细胞增殖和凋亡的异常。4GST能够在HSV-1感染早期抑制gOmRNA的表达。硕士研究生王倩(人体解剖组织胚胎学)指导教师于向民教授关键词：人单纯疱疹病毒I型；Genistein；人星形胶质瘤细胞；细胞增殖；细胞凋亡课题来源：国家自然科学基金支持(30770105，81070501)：青岛市科技局资助项目(08一卜3—30-jch)山东省“病原生物学”泰山学者工程资助项目InhibitoryEffectsofGenisteinonAbnormalChangesofP

7、roliferationandApoptosiscausedbyHSV-1inHumanGliomaCellsAbstractobjective：1Toestablishan伽vitroHerpessimplexvirus-1(HSV-1)infectionmodelofhumangliomacells(U251)andinvestigatetheeffectsofHSV-1onproliferation，apoptosisandcelllcycleofU251cells．2Toinvestigatetheinhibitor

8、yeffectsofGenistein(GST)OilabnormalchangesofproliferationandapopptosisinU251cellscausedbyHSV-1infection．Materialsandmethods：1HSV-1groupcellswerei