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时间:2019-02-15
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1、动物来源食品中林可霉素的检测方法研究进展徐舂杰龚丽贞陈志黄潇航黄志坚殷光文福建农林大学福建农林大学动物科学学院/动物药物工程实验室摘要:本文的目的是为动物来源食品检验人员提供相关参考,通过列举动物来源食品中的林可霉素残留对人体产牛不良反应和当前各种检验方法,最后充分说明了相关科研工作很到位。关键词:林可霉素;不良反应;残留检测;作者简介:徐舂杰(1990.6~),男,江西人;福建农林大学硕士研究生;研究方向:兽医学作者简介:殷光文(1983.1「),男,河南人;福建农林大学副教授;研究方向:兽医学作者简介:龚丽贞,福建农林大学动物科学学院/动物药物
2、工程实验室作者简介:陈志,福建农林大学动物科学学院/动物药物工程实验室作者简介:黄潇航,福建农林大学动物科学学院/动物药物工程实验室作者简介:黄志坚福建农林大学动物科学学院/动物药物工程实验室基金:福建省高校杰出青年人才培育项目林可霉素与大环内酯类的抗菌谱相似。随着临床应用,其不良反应也与H俱增。常见的不良反应有:1•腹或胃绞痛、疼痛、严重气胀;2.严重腹泻(水样或血样);3.发热;4•恶心、呕吐;5.异常口渴;6•异常疲乏或软弱;7.显著体重减轻(伪膜性肠炎)UL利用各种高效精确的科学方法检测动物来源食品中的林可霉素残留量,显然是减轻或避免药残威
3、胁的重要一环。动物来源食品中林可霉素残留量常用的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱-质谱联用技术(C-MS)、高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)、高效液相色谱一电喷雾串联质谱法(HPLC-EST-MS/MS)、磁免疫化学发光法、胶体金免疫层析法、酶联免疫吸附法、气相色谱法[2]。高效液相色谱法(HPLC)黄新球等利用该方法测定蜂王浆中林可霉素的残留。样品经乙月青(含3%的氨水)除蛋白,正己烷除脂肪,在217nm波长下用紫外检测器检测,平均回收率为102.6%~107.3%。林可霉素在质量浓度5.0^100.Oug/mL范围内
4、与峰面积呈良好的线性关系,最低检出限为0.09Mg/mL。该方法具有平行性好,成本低,加标回收率高等优势,很值得借鉴,是检测蜂王浆中林可霉素残留的好方法。二、高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)李烈飞等皿利用该方法检测猪瘦肉中多种兽药包括林可霉素的药物残留量。猪肉样品经0.1%甲酸乙月青水(80:20)溶液提取。在不需活化和平衡的条件下通OasisPRiMEHLB固相萃取柱,氮吹后用甲醇复溶,将所得前处理样品进行反相液相色谱分离,最后质谱分析。根据保留时间和母离子及两个特征子离子信息进行定性分析,以基峰离子进行定量。结果表明:红霉素、替米
5、考星、林可霉素1.0^20ug/L浓度范围内线性关系良好,相关系数(r2)均大于0.99,空白样品加标回收率范围为73.6%~103・6%,相对标准偏差小于10.0%0红霉素、替米考星、林可霉素(目标化合物)方法检出限(LOD)为l.Ong/kg。该方法操作简便、准确、灵敏、重现性好、基质干扰少,适用于瘦猪肉中红霉素、替米考星、林可霉素的测定。三、液相色谱/质谱联用技术(C-MS)周萍等固用C-MS检测林可霉素和大环内酯类药物在蜂王浆中的残留量。在该方法中采用乙膳-氨水(97+3)提取,提取液浓缩至干,用pH二8.0磷酸缓冲溶液溶解,并用乙酸乙酯进
6、行反萃取,从而净化样品。木方法检出限位0.2〜0.9ug/kgo四.高效液相色谱一电喷雾串联质谱(HPLC-ESI-MS/MS)法阮祥春等回用高效液和色谱一电喷雾串联质谱法检测林可霉素在蜂蜜中的残留。先用固相萃取柱对检测样品进行净化,然后利用液相色谱进行分离,最后进行质谱分析。利用多反应监测技术(MRM)对信号进行采集。实验结果显示在1.0^20.Ong/ml线性范围内,峰强度与添加浓度的线关系良好(r2>0.9996)。该方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点。五.磁免疫化学发光法聂雯莹等XZ1用磁免疫化学发光法检测牛奶中的林可霉素残留量。该
7、方法中取l.Og林可霉素加入到乙腊中溶解,再加入0.82g重銘酸卩比卩定(PDC),然后与氨基丁酸进行缩合得到林可霉素半抗原,半抗原产物经辣根过氧化物酶标记,得到林可霉素酶标抗原。此外用林可霉素半抗原制备免疫原,免疫原经动物免疫、细胞融合、杂交瘤细胞筛选后可最终制备林可霉素单克隆抗体,进而可制备得到磁标抗体。全自动磁免疫化学发光仪吸取酶标抗原,待测样品,磁标抗体,经过一系列检测操作后得到相对光强度。该方法对牛奶中林可霉素的检测限为5.88ug/L,具有较高的特异性,回收率为85・8%~113・3%,变异系数为小。六、胶体金免疫层析法贾芳芳等宜用研制
8、成功胶体金免疫层析试纸条并检测了牛奶中林可霉素的含量。在该方法中吸取200ml待检样本于微孔中,混匀后室温孵育,将标记好的
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