内毒素耐受对急性肝功能衰竭大鼠肝脏cxcr7表达影响

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1、目录缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·DIODOQDODBD00⋯3英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7月U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯‘，材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯OODOg⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯93．主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯94．主要

2、软件⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯··105．主要试剂的配制方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111．动物分组及建模⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1l2．标本取材⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯113．肝组织病理检查⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯124．血清肝功能检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯125．RT-PCR检测各组大鼠肝组织CXCR7mRNA表达⋯⋯⋯⋯⋯126．Western-blot检测CXCR7蛋白含量⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15

3、7．统计学处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IIOQOQ17结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··18讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯qOQODO·OgIQ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24附萄专⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯·28致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37主要缩略词词表缩略词英文中文ALFacuteliverfailure急性肝功能衰竭D-GALND-galactosamineD一胺基半乳糖LPSLipopolysaccharide脂多糖ETTEndotoxinTolerance内毒素耐受TLR4Tol卜likereceptor4Toll样受体4NF—KBNuclearfactor—KB核因子一KBIL一6Interleukin一6自介素一6ALTAlanineaminotransferase丙氨酸氨基转移酶ASTAspartateminotra

5、nsferase天冬氨酸转氨酶HEHematoxylinandEosin苏木素一伊红RT-PCRReverse反转录酶一聚合酶链transcription—polymerasechain锁反应wBWestern-blot蛋白免疫印迹APammoniumpersulfate过硫酸胺SDSsodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸钠PBSPhosphatebufferedsaline三羟甲基氨基甲烷TrisTris(hydroxymethyl)aminomethane磷酸盐缓冲盐水1露温州医学院硕士学位论文

6、2露温州I医学院硕士学位论文内毒素耐受对急性肝功能衰竭大鼠肝脏CXCR7表达的影响目的：急性肝功能衰竭(AcuteLiverFailure，ALF)是一种发生机制极复杂、病死率甚高的严重临床疾病，有效的预防和治疗仍是临床医生极具挑战的难题，因此深入认识ALF的发生机制，为临床治疗提供有效的指导是增加ALF患者生存率的迫切需要。急性肝功能衰竭发生时机体内发生内毒素血症，内毒素的主要活性成份～脂多糖(1ipopoIysaccharide，LPS)可以刺激机体释放多种炎性介质，加重肝细胞损伤⋯。但当机体或单核巨噬细胞经

7、小剂量LPS预处理，形成内毒素耐受(endotoxintolerance，ETT)后，对致死剂量LPS的再次刺激呈低反应或无反应的现象o]。我们希望通过诱导ETT来减少机体发生肝功能衰竭时各种炎性因子的大量释放，最终减轻机体损伤。因此明确内毒素耐受在肝衰竭发生机制中的具体作用可为临床预防和治疗ALF提供更多有效的手段∞1。本研究通过观察内毒素耐受对急性肝功能衰竭大鼠肝组织中CXCR7表达变化的影响，初步探讨CXCR7在内毒素耐受发生过程中的意义。方法：健康雄性sD大鼠66只，随机分为正常对照组(N组)、急性肝功能

8、衰竭组(ALF组)和内毒素耐受组(ETT组)。ETT组和ALF组先分别用LPS(0．1mg／kg)和等量生理盐水腹腔注射，1次／日，于第5次注射后禁食24h，24h后ETT组和ALF组同时腹腔注射D一氨基半乳糖(D—galactosamine，D-GalN)(800mg／kg)和LPS(8ug／只)，分别在注射后2h、6h、12h、24h、48h5个时间点留取大鼠血清及肝