sox9基因重组腺病毒对兔腰椎间盘退变治疗

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3、背部、臀部、腹股沟处的典型或不典型疼痛，客观体征少，影像学无明显神经根受压，保守治疗效果差，目前大多学者认为这是椎问盘源性腰疼。椎间盘退变在影像学上表现为：黑间盘，纤维环后方的高信号区；病理上是指：椎间盘失去色泽变暗、无弹性，厚薄不一伴有纤维化，其表现为纤维环层状结构紊乱和进行性纤维化，凝胶样髓核逐渐消失，纤维环与髓核见分界不清。椎问盘退变发生的病因及机制尚无确切定论，大多数学者认为与损伤、椎间盘营养、基因表达缺失、自身免疫等因素有关。目Ii{『针对椎间盘源性下腰痛(disc．geneticlowbackpain)主要采取理疗及抗炎药物应用等保守治疗

4、手术治疗，这些治疗方法只是治标而不治本。因此，我们需要针对IVDD发病机制进行研究，从发病原因入手，对因治疗，从根本上治疗、甚至是预防IVDD。近年来新兴的生物学再生治疗方法以退变椎问盘为靶向治疗目标，从病因出发，以重建为理念，已经备受关注，其包括有分子疗法、基因疗法、细胞疗法及组织疗法等。这些生物疗法的优势在于能够很好地维持J下常椎『自J盘的生物力学稳定性、并且不破坏周围的解剖学结构、保持椎体问的相对运动等。随着对椎间盘退变分子生物学的研究，已经发现其与许多基因的缺失，蛋白的调控有关，其中Sox9基因的表达就参与了椎间盘退变的调控。在Sox基因家族

5、中，Sox9基因有着非常重要的地位，它对调节脊椎动物的成长、软骨发育有着重要作用，对人和哺乳动物的调控主要是通过其对软骨生成及性别决定而起作用的。随着研究的深入，人们已经部分能从分子水平阐明椎间盘退变I摘要机制，Sox9基因参与了椎问盘整个过程的调控，并起着重要的作用，但是，这些实验数据大多出自体外，在体内Sox9基因是如何调控椎问盘退变的，以及能否通过增NSox9基因的表达来逆转退变或者治愈退变，关于这方面的研究缺乏有力的实验数据。对Sox9基因的体外研究虽然已有很多，但是体外环境的影响因素较单一，很难模拟体内的复杂内环境。目前在国外已有在实验动物

6、体内的相关研究报道，但研究尚少，仍需大量实验数据来进一步说明Sox9基因在实验动物体内的作用过程及机制，来阐明Sox9基因是否对椎问盘退变有阻止和治疗效果。2目的1．通过微创技术制造兔腰椎问盘退变模型，使模型更易制作、更稳定、更接近自然退变，从而使之更符合人类腰椎问盘退变的病理过程。2．用采用的AdMax包装系统构建Sox9基因腺病毒载体，构建过程更简单、易行，并可使Sox9基因有很高的表达水平，可以更广泛的应用入试验，阐明Sox9基因对椎问盘退变的作用。3．证明Sox9基因对微创技术下制作的兔退变椎间盘内的治疗作用，并从分子水平上说明其变化意义，为

7、椎间盘的基因治疗增加新证据。3方法1．在动物模型的制作方面，本实验在仔细研究大耳白兔胸、腰椎、硬模、神经根的走向，椎前大血管、腹膜及其局部解剖的基础上，并在C型臂X光机下反复定位穿刺操作，找到了此安全微创的穿刺通道。穿刺通路远离腹膜及重要血管神经，且在C臂引导下进行，．操作准确，一步到位，误伤几率小，有操作微创化、简单化、损伤小，感染率低、动物致残率低、存活率高、接近正常椎间盘退变等优点。应用此方法在C型臂x光机下，定位18只兔子的L3／4、L辎、L5／6椎问盘，并通过上述微创法穿刺纤维环，术后将造模动物随机分为三组(A、B、C)，每组6只。分别于造

8、模术后4、8、12周对三组进行MRI检查，以Pfirrmann分级法作为评估标准进行分级，并前后对照。每组行