牛白介素32基因可变剪接体(il-32酌)的分子克隆及功能验证cloning

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1、Seediscussions,stats,andauthorprofilesforthispublicationat:https://www.researchgate.net/publication/272830294CloningandCharacterizationofInterleukin-32isoform(IL-32-gamma)fromBovine(Bostaurus)ArticleinChineseJournalofAgriculturalBiotechnology·January2013CITATIONSREADS06

2、35authors,including:XiangChengTheOhioStateUniversity31PUBLICATIONS240CITATIONSSEEPROFILESomeoftheauthorsofthispublicationarealsoworkingontheserelatedprojects:Glucose-mediatedN-glycosylationofSCAPIsEssentialforSREBP-1ActivationandTumorGrowthViewprojectAllcontentfollowing

3、thispagewasuploadedbyXiangChengon05March2015.Theuserhasrequestedenhancementofthedownloadedfile.Onlinesystem:http://www.jabiotech.org农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2013,21(1):38~46DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2013.01.005研究报告Letter牛白介素32基因可变剪接体(IL-32酌)的分子克隆及功能验

4、证*魏育蕾程祥杨藩张军林王华岩西北农林科技大学动物医学院，杨凌712100*通讯作者，hhwang101@163.com摘要牛白细胞介素32(interleukin-32,IL-32)基因是近年发现的一种新型功能基因，是一种炎症性细胞因子，其主要作用是诱导其他细胞因子和化学因子的产生，并在自身免疫性炎症性疾病中发挥重要作用，可促进细胞凋亡，从而抑制结核分支杆菌(Mycobacterium)等多种分支杆菌感染，提高动物机体抗病能力。本研究从秦川牛(Bostaurus)脾脏组织中分子克隆了牛IL-32茁基因及其可变剪接体IL-32酌基因，

5、经序列分析表明，该基因定位于牛25号染色体上，实验克隆的牛IL-32茁基因与NCBI中已发表序列有5个碱基不同，通过蛋白二级序列比较，该差异并不影响蛋白的折叠，推测这几个碱基差异是秦川黄牛IL32基因的SNP。IL-32酌比IL-32茁序列多了第二内含子，导致编码序列多编码47个氨基酸。为了研究该可变剪接体的功能，本研究构建了真核表达载体pIRES-IL32酌-GFP。将该载体稳定转染小鼠(Musmusculus)巨噬细胞RAW264.7，获得超表达牛IL-32酌基因的小鼠巨噬细胞，同时以稳定转染人IL-32酌基因的小鼠巨噬细胞为阳性

6、对照，Real-timePCR检测表明，超表达牛IL-32酌具有调节IL-1茁、IL-6、MIP2、TNF琢等细胞因子的功能，其趋势与阳性对照人IL-32酌的趋势相近。本实验研究为进一步研究牛IL-32酌基因生物学功能打下了基础。关键词牛，白细胞介素32(IL-32)，分子克隆，巨噬细胞，肿瘤坏死因子(TNF琢)CloningandCharacterizationofInterleukin-32Isoform(IL-32酌)fromBovine(Bostaurus)*WEIYu-LeiCHENGXiangYANGFanZHANGJun

7、-LinWANGHua-YanCollegeofVeterinaryMedicine,NorthwestAgriculturalandForestryUniversity,Yangling712100,China*Correspondingauthor,hhwang101@163.comAbstractTherecentstudiesdiscoveredbovineleukocyteinterleukin-32gene(IL-32)isanewtypeofinflammatorycytokineandhasmanybiological

8、functions.Itcaninducetheimmunecellstoproductimmunefactorsandchemicalfactorsandplayanimportantroleinautoimmune/