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《潘生丁抑制平衡型核苷转运蛋白对5氟尿嘧啶在胰腺癌细胞》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、中国药科大学学报544JournalofChinaPharmaceuticalUniversity2003,34(6):544～548潘生丁抑制平衡型核苷转运蛋白对5氟尿嘧啶在胰腺癌细胞内浓聚的影响1①1232111刘胜利,王晶敏,鞠煌先,朱广华,杜丹,朱春富,徐皓,黄海(12东南大学医学院附属中大医院,南京210009;南京大学化学化工学院,南京210009;3东南大学公共卫生学院,南京210009)【摘要】目的:研究阻断平衡型核苷转运蛋白(ENTs)后对胰腺癌细胞膜转运5氟尿嘧啶(52FU)能力的影响。方法:培养的PANC21细胞分为ENTs阻断组
2、和ENTs非阻断组,阻断组用潘生丁将ENTs阻断,非阻断组则未用潘生丁。两组培养基中均加入52FU100μg/ml。温育15,30min,1,2,4h后细胞用橡皮刮取收集。取等量细胞刮取液2份各100μl,一份用毛细管区带电泳测定细胞内52FU总量、另一份用作平行样本测定总蛋白含量。根据平行样本细胞总蛋白来确定细胞数,再依细胞体积计算单细胞内药物浓度。结果:ENTs非阻断组细胞内52FU浓度在15min内上升较快,达66199±10116pg/nl,为培养基中52FU浓度的67%,30min为83175±51333pg/nl,1h达高峰(92186±1
3、1604pg/nl),为培养基中52FU浓度的93%,以后处于平台。ENTs阻断组细胞内52FU浓度上升较慢,15min仅为ENTs非阻断组浓度的68165%;30min为ENTs非阻断组浓度的70166%;1h达ENTs非阻断组的最高浓度;但此后ENTs阻断组细胞内52FU浓度仍继续升高,2h达13813±91769pg/nl,为ENTs非阻断组的1164倍(P<0101)。结果提示,完全阻断ENTs后早期细胞内52FU浓度上升较慢,但随着细胞在52FU内暴露时间延长,52FU在细胞内浓聚作用明显。结论:阻断胰腺癌细胞膜上ENTs核苷转运蛋白可增加5
4、2FU在细胞内的浓聚。【关键词】胰腺癌;核苷转运蛋白;52氟尿嘧啶;潘生丁;毛细管区带电泳【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】100025048(2003)0620544205核苷是细胞合成核酸的重要物质。除重新合[5]4%。虽然化疗是辅助治疗胰腺癌的重要手段,成途径外,细胞可通过核酸的补救合成途径即重新但是胰腺癌细胞对化疗药物多存在固有或获得性利用核酸代谢产物或利用细胞外核苷来合成核[6]阻抗。本文研究52FU在胰腺癌细胞株PANC21[1]酸。核苷具有亲水性,细胞外核苷需借助细胞膜内的浓聚过程,并研究用潘生丁将ENTs核苷转运上核苷转
5、运蛋白才能进入细胞。迄今发现的核苷蛋白阻断后对52FU在胰腺癌细胞内的浓聚过程的转运蛋白分为两大类,即平衡型核苷转运蛋白(E2影响。quilibrativeNucleosideTransporters,ENTs)和钠浓度+1材料与方法依赖型核苷转运蛋白(NaConcentrativeDependent[2]NucleosideTransporters,CNTs)。临床常用治疗胰由于胰腺癌PANC21细胞具有贴壁生长的特腺癌的核苷类化疗药物亦需借助核苷转运蛋白才性,收集细胞时若采用常用的消化方法将难以保证[3]能进入细胞。有报道显示,核苷转运蛋白抑制剂细
6、胞内52FU浓度的稳定。为确保检测样本中的52如潘生丁(dipyridamole)、地拉唑(dilazep)及其衍生FU均在细胞内,本研究先将培养液除出并清洗干物,可通过调节药物进出细胞过程或干扰核酸合成净后,再将细胞刮下收集。在收集细胞的过程中有[4]的补救途径来增强核苷类化疗药物的抗癌效果。部分细胞被破坏,不能用普通方法对细胞进行计因此,抑制有关引起药物向细胞外返流的核苷转运数。本研究将根据平行样本中总蛋白含量来确定蛋白如ENTs,可能有提高细胞内药物有效浓度的样本中的细胞数量,再根据检测样本中52FU含量潜在作用。胰腺癌预后很差,5年总生存率不到
7、与平行样本中细胞数量计算出单细胞中52FU含①【收稿日期】2003205209【3通讯作者】Tel:025283272195,83272197【基金项目】铁道部科技基金资助项目(No1J2000Z094)©1994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net6期刘胜利等:潘生丁抑制ENTs核苷转运蛋白对52FU在胰腺癌细胞内浓聚的影响5452量,根据单细胞体积计算出单细胞内52FU浓度。标准曲线为y=117285x+012
8、57(r=01998,F=111仪器与试剂96115,P<0101)。所使用的化学试剂均为分析
