温阳补肾药对骨髓间充质干细胞促增殖的实验研究

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1、中国中医骨伤科杂志２０１２年１０月第２０卷第１０期１·实验研究·温阳补肾药对骨髓间充质干细胞促增殖的实验研究黄胜杰１１１△李媚王和鸣［摘要］目的：观察、比较巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎补对体外培养ＳＤ大鼠骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣｓ）促增殖的影响，探讨其作用机理。方法：建立ＳＤ大鼠ＢＭＳＣｓ体外培养体系，倒置显微镜、苏木精－伊红染色进行形态学观察；流式细胞仪（ＦＣＭ）进行ＢＭＳＣｓ细胞周期分析；ＭＴＴ法检测ＢＭＳＣｓ生长曲线；４味温阳补肾药含药血清配制，确定其最佳药物浓度和最佳血清浓度对ＢＭＳＣｓ促增殖的影响。结果：体外培养大鼠ＢＭＳＣｓ

2、经倒置显微镜、苏木精－伊红染色的形态学观察均符合ＢＭＳＣｓ的形态及生长特点。高、中、低剂量的四味中药含药血清对Ｆ３ＢＭＳＣｓ２４、４８、７２ｈ的增殖效应显示，以中剂量组２０％含药血清对Ｆ３ＢＭＳＣｓ４８ｈ后促增殖最明显，其组间比较结果为淫羊藿＞骨碎补＞鹿角胶＞巴戟天。结论：巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎补四味温阳补肾药均有促ＢＭＳＣｓ增殖作用。淫羊藿促ＢＭＳＣｓ增殖效果最佳，其组间比较结果为淫羊藿＞骨碎补＞鹿角胶＞巴戟天。［关键词］巴戟天；鹿角胶；淫羊藿；骨碎补；骨髓间充质干细胞；增殖；［中图分类号］Ｑ９５－３３［文献标识码］Ａ［文章编号］

3、１００５－０２０５（２０１２）１０－０００１－０４Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ－ｐｒｏｍｏｔｉｎｇＥｆｆｅｃｔｏｆＷａｒｍｉｎｇＫｉｄｎｅｙＹａｎｇＭｅｄｉｃｉｎｅｏｎＢｏｎｅＭａｒｒｏｗＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＳｔｅｍＣｅｌｌｓ１１１ＨＵＡＮＧＳｈｅｎｇｊｉｅＬＩＭｅｉＷＡＮＧＨｅｍｉｎｇ１ＦｕｊｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｆｕｚｈｏｕ３５０００３，ＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅａｎｄｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ－ｐｒｏｍｏｔｉｎｇｅ

4、ｆｆｅｃｔｓｏｆＭｏｒｉｎｄａＯｆｆｉｃｉｎａｌｉｓＨｏｗ，ＣｏｌｌａＣｏｒｎｕｓＣｅｒｖｉ，ＲｈｉｚｏｍａＤｒｙｎａｒｉａｅａｎｄＨｅｒｂａＥｐｉｍｅｄｉｉｏｎｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ（ＢＭＳＣｓ）ｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉ－ｇａｔｅｔｈｅｐｏｓｓｉｂｌｅｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅｉｎｖｉｔｒｏｃｕｌｔｕｒｅｓｙｓｔｅｍｏｆＳＤｒａｔＢＭＳＣｓｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．ＴｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｉｎｖｅｒｔｅｄｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅａｎｄＨＥｓｔ

5、ａｉｎｉｎｇ．ＭＴＴａｓｓａｙｗａｓｕｓｅｄｆｏｒｇｒｏｗｃｕｒｖｅ．ＲａｔｓｅｒｕｍｃｏｎｔａｉｎｉｎｇＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｏｆｗａｒｍｉｎｇｋｉｄｎｅｙｙａｎｇｗａｓｐｒｅｐａｒｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｉｎｖｅｒｔｅｄｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅａｎｄＨＥｓｔａｉｎｉｎｇｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒａｔＢＭ－ＳＣｓｃｕｌｔｕｒｅｉｎｖｉｔｒｏｗｅｒｅｉｎａｃｃｏｒｄａｎｃｅｗｉｔｈＢＭＳＣｓｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｎｄｇｒｏｗｔｈｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ．Ｔｈｅｈｉｇｈ，ｍｅｄｉｕｍａｎｄｌｏｗｄｏ－ｓｅｓｏｆｔｈｏｓｅｆｏ

6、ｕｒＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｒａｔｓｅｒｕｍｐｒｏｍｏｔｅｄｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｔ２４ｈ，４８ｈ，ａｎｄ７２ｈ，ｗｉｔｈ２０％ｍｅｄｉｕｍｄｏｓａｇｅｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐａｔ４８ｈｓｈｏｗｉｎｇｔｈｅｂｅｓｔｐｒｏｍｏｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔ．ＴｈｅｐｒｏｍｏｔｉｎｇｅｆｆｅｃｔｓｆｒｏｍｔｈｅｂｅｓｔｔｏｔｈｅｌｅｓｓｅｆｆｅｃｔｉｖｅｗｅｒｅＲｈｉｚｏｍａＤｒｙｎａｒｉａｅ，ＨｅｒｂａＥｐｉｍｅｄｉｉ，ＣｏｌｌａＣｏｒｎｕｓＣｅｒｖｉ，ａｎｄＭｏｒｉｎｄａＯｆｆｉｃｉｎａｌｉｓＨｏｗ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓ

7、ｉｏｎ：ＭｏｒｉｎｄａＯｆｆｉｃｉｎａ－ｌｉｓＨｏｗ，ＣｏｌｌａＣｏｒｎｕｓＣｅｒｖｉ，ＲｈｉｚｏｍａＤｒｙｎａｒｉａｅａｎｄＨｅｒｂａＥｐｉｍｅｄｉｉｗｅｒｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｉｎｐｒｏｍｏｔｉｎｇｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＢＭＳＣｓ，ａｍｏｎｇｗｈｉｃｈｈａｓｔｈｅｂｅｓｔｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ－ｐｒｏｍｏｔｉｎｇｅｆｆｅｃｔ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＭｏｒｉｎｄａＯｆｆｉｃｉｎａｌｉｓＨｏｗ；ＣｏｌｌａＣｏｒｎｕｓＣｅｒｖｉ；ＨｅｒｂａＥｐｉｍｅｄｉｉ；ＲｈｉｚｏｍａＤｒｙｎａｒｉａｅ；Ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙ－ｍａｌ

8、ｓｔｅｍｃｅｌｌｓ；Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ肾主骨生髓，温阳补肾药中巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎霉素溶液（ＨｙＣｌｏｎｅ）、胰蛋白酶（１：２５０，ＡＭＲＥＳＣＯ）、噻唑蓝补为骨伤科最常见的促