南昌地区输血hbv残余风险评估及献血者中hbv基因分型论文

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1、学位论文独创性声明学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文

2、被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日I万方数据摘要摘要目的:探讨南昌地区献血者中酶联免疫吸附测定法（enzyme-lin

3、kedimmunosorbentassay,ELISA）筛查策略的输血乙型肝炎病毒（HepatitisBVirus,HBV）残余风险；并对献血者中HBV感染人群进行HBV基因分型情况调查，为该地区HBV分子流行病学提供研究数据。方法:1.采用HBsAgELISA法（双抗体夹心法）对2012年1月1日至2012年12月31日献血者样本64400人份进行检测，筛查出HBsAg(+)的献血者；2.采用实时荧光PCR法（Real-TimePCR)对上述时间段HBsAg(-)献血者进行HBV/HCV/HIV3项联合病毒核酸检测（Cob

4、asTaqScreenMPX1.0试剂），检测模式为混检模式＋拆分检测，即先进行6样本混样检测，再对混样检测阳性样本进行单样本拆分检测；对拆分检测阳性样本进行分项定量检测和乙肝两对半检测，评估HBVDNA（+）献血者感染状况及输血HBV感染残余风险；3.采用分层随机抽样法分别抽取200人份HBsAg（+）样本和30人份HBVDNA（+）样本，其中HBsAg（+）样本先采用实时荧光定量PCR法进行HBVDNA定量检测，筛检出HBVDNA（+）样本，再采用核酸纯化柱提取法对抽取的HBVDNA（+）、HBsAg（+）和HBVDNA

5、（+）、HBsAg（-）样本进行DNA提取，提取物进行HBVDNAS基因巢氏PCR扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳判断产物分子量后，送测序公司进行测序和基因分型，确定其基因型，评价HBV基因分型情况。结果:1.HBsAgELISA法共检测样本64400人份，检出HBsAg（+）样本862人份，HBsAg携带率与年龄、性别等因素呈一定相关性；2.对63538人份HBsAg（-）样本进行HBV/HCV/HIV三项联检，共检出139人份病毒核酸检测阳性样本，139人份病毒核酸阳性样本进行分项定量检测，共检出HBVDNA(+)-1样本

6、84人份，输血后HBV残余风险为0.13%，其病毒载量以＜20IU·mL为主（59人份，占70.2%）；84人份HBVDNA(+)样本进行乙型肝炎两对半检测，发现乙型肝炎可疑窗口期感染6人份（占7.1%），隐匿性HBV感染63人份（占75.0%），其他(HBsAg+)15人份(17.9%)；相关因素分析提示高年龄组男性献血者具有更高的输血HBV残余风险，建立固定献血者队伍对降低输血HBV残余风险作用不明显；3.200份HBsAg（+）样本中共检出HBVDNA样本118份II万方数据摘要（59.0%），HBVDNA检出率与HB

7、sAgELISA法S/CO值呈正相关性；148人份样本进行DNA提取和S基因巢氏PCR扩增，经3%琼脂糖凝胶进行产物分子量鉴定，72人份样本测序要求，占48.6%；72人份样本送基因公司测序，检出B基因型为47人份（65.3%），C基因型为19人份（26.4%），6例未检出基因型（8.3%）。结论：1.ELISA法检测HBsAg(-)献血者的输血后HBV感染残余风险依然存在，其感染状况多以低病毒载量的隐匿性HBV感染为主，采用核酸检测技术对献血者进行血液常规筛查，可降低输血HBV残余风险，提高输血安全；2.南昌地区献血者中H

8、BV感染人群的HBV基因型以B型为主，C型次之，未见其它基因型。关键词：HBsAg；基因型；核酸检测技术；献血者；残余风险；隐匿性HBV感染III万方数据AbstractABSTRACTObjective:ThisstudyanalyzedtheHBVresidualriskbyusing