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1、江苏地区不同类型乙型肝炎患者HBV基因分型研究论文【关键词】肝炎病毒,乙型；基因型；聚合酶链反应HBVgenotypinginhepatitisBpatientsinJiangsuprovince【Abstract】AIM:ToinvestigatethedistributionofhepatitisBvirus(HBV)genotypesofhepatitisBpatientsinJiangsuprovinceandanalyzetherelationshipofHBVgenotypesHBVD
2、NAlevelsofpatients.METHODS:TheHBVgenotypesandHBVDNAlevelsof176patientsinJiangsuprovinceequantitativePCRandTaqmanMGBprobetechnology.RESULTS:Among176HBVinfectedpatients,theproportionsofgenotypeC,BCmixedtype,B,AandDixedtypeinHBVDNAload(P0.05),andtheHBVDN
3、AlevelofgenotypeBCmixedtypeongthepatientsofchronichepatitisBongthepatientsofacutehepatitisB,livercirrhosisandhepatocellularcarcinoma,.freelixedtypearethetinantgenotypesinthepatientsinJiangsuprovince,andgenotypeB,A,andDarealsofound,butnotmon.TheHBVDNAl
4、oadofgenotypeB,CmixedtypeissignificantlyhigherthanthatofgenotypeC.【Keyerasechainreaction【摘要】目的：了解江苏地区乙型肝炎病毒基因型分布特征，探讨HBV各基因型与血清HBVDNA水平的关系.方法：采用荧光定量PCR结合TaqmanMGB探针技术，对江苏地区176份乙型肝炎患者血清中的HBVDNA进行基因分型和定量检测.结果：176例血清中，C型117人（66.5%），B,C型40人（22.7%），B型9人（5.
5、1%），D型1人（0.6%），A型1人(0.6%).C型与B,C混合型在HBVDNA水平上存在统计学差异（P0.05）.freelanMGB探针技术，对江苏淮安地区176例乙型肝炎患者进行HBV基因分型和HBVDNA定量检测，探讨HBV各基因型与血清HBVDNA水平的关系.1材料和方法1.1材料176份HBV感染血清均于200509/200602采自江苏省淮安市第四人民医院门诊和住院患者，其中急性乙型肝炎19例，慢性乙型肝炎119例，肝硬化及肝癌38例.其中，男性134例，女性42例，年龄10～7
6、7（平均年龄37.5）岁，诊断标准符合2000年第十次全国传染病与寄生虫病学会和肝病学分会联合修订的病毒性肝炎防治方案［2］.GeneAmpR5700SequenceDetectionSystem为美国PE公司产品.HBV基因分型荧光PCR检测试剂盒，由杭州博赛基因诊断技术有限公司提供；HBVPCR荧光定量检测试剂盒由上海复星医学科技发展有限公司提供，检测灵敏度为4.2×102IU/L.1.2方法1.2.1HBVDNA定量检测HBVDNA浓度测定采用荧光定量PCR法，HBVDNA提取按操作说明.1
7、.2.2HBVDNA基因分型检测血清标本50μL加核酸提取液50μL，振荡10s.100℃干浴10min，14593g离心10min，上清液即可用作PCR反应的模板.基因扩增时，取上清液4μL分别加入含有36.4μL各型基因型混合液的反应管中，混匀，14593g离心数秒，反应管置于5700定量荧光仪上，反应条件为37℃×2min，94℃×2min；再按94℃×10s→62℃×40s，循环40次，荧光检测在62℃，荧光通道检测选择FAM.统计学处理：计量数据以x±s表示，组间比较采用方差分析及LSD
8、t检验.计数资料组间比较采用χ2检验.2结果2.1176例患者的HBV基因分型及其分布对江苏地区176例不同临床类型的HBV患者进行基因分型，本研究检测到5种类型的基因型，构成比由高到低依次为：C型66.5%（117/176），B，C混合型22.7%（40/176），B型5.1%（9/176），A型0.6%（1/176），D型0.6%（1/176），无法分型4.5%（8/176）.因此，C型和B,C混合型是该地区HBV的优势基因型，B型较少，A型和D型都只检测到1例，没有发现E,G
