mir1792簇在食管鳞癌中表达及其对临床病理特征和预后意义地研究

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1、万方数据温州医科大学硕士学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11第一章：MiR一17—92簇在食管鳞癌组织中的表达及临床意义⋯⋯13材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40一J、结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42第二章：食管鳞

2、癌中p53蛋白的表达水平与miR-17-92簇的相关性研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯50第三章：Mir-17-92簇成员miR-18a在人食管鳞癌细胞株中的表材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯58分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、63·J、结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯65第四章：MiR-17-92簇成员miR-18a在食管癌血清中的表达及其诊断2万方数据温州医科大学硕士学位论文意义的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯66材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯66结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。⋯⋯⋯70分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯75参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯78附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯86致谢⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯87综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯88独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯97万方数据温州医科大学硕士学位论文中文摘要MiR-17—92簇在食管鳞状上皮细胞癌中的表达以及其对临床病理特征和预后意义的研究目的：研究食管鳞癌(ESCC)组织中miR一17—92簇(miR一17a，miR一18a，miR一19a，miR一20a，miR一19b和miR一92a)的表达水平以及细胞和血清中miR一17—92簇成员miR一18a的表达水平，探讨miR-1

5、7-92簇的表达差异与ESCC患者临床病理特征、p53蛋白的表达状况及预后的相关性，从而评估miR一17—92簇成员的表达水平能否作为ESCC诊断及预后评估的miR-17—92簇成员的表达水平能否作为ESCC诊断及预后评估的指标。方法：1．在2008年2月和2010年10月期间收集105例行食管癌根治术后患者的手术标本(食管癌组织和肿瘤远处大：：J：5cm处iE常食管上皮)。所有患者术前未行放化疗，将收集到的样本存放在液氮储存中。提取总RNA后应用polyA加尾法进行反转录反应。应用实时定量荧光PCR法检测105例ESCC组织及相应癌旁

6、正常组织的miR-17-92簇各成员的表达水平。2．应用免疫组化法检测上述105例病例中的96例ESCC组织qhp53蛋白的表达情况。结合miR一17—92簇各成员的表达情况，分析p53蛋白的表达与miR一17—92簇各成员表达的相关性。3．选用KYSE510、ECl、TEl3、KYSEl170、Ecal09、ECl及EC9706六株人食管鳞状上皮细胞癌细胞株和HEEpiC食管正常上皮细胞株，应用实时定量荧光PCR法检测miR一17—92簇成员miR-18a的表达在各细胞株间的表达水平。4．选取2008年2月至2010年1月期间在浙江省

7、肿瘤医院接受食管切除术(RO4万方数据温州医科大学硕士学位论文或R1)的67例ESCC患者，术前和术后7天采集血清样本。采集45位健康志愿者的血清作为对照。应用茎环法进行反转录反应，特异性高的Taqman探针法检测血清miR-17-92簇成员miR一18a的表达变化。5．统计分析：以小核苷酸RNAU6(RNU6B)为内参，我们采取2。△△a法比较目标miRNA在食管鳞癌和正常食管组织之间的表达差异。Wilcoxon符号秩和检验来分析在食管癌组织中的miR-17-92基因簇的表达与正常食管上皮之间的相关性。采用Fisher精确概率检验或x

8、2检验进行miR一17—92基因簇的表达与临床病理因素、p53蛋白表达水平之间的相关性分析。采用Kaplan—Meier法和Cox比例风险进行无进展生存期和总生存期评估，以确定的miR-17—92基因簇表达