microrna214在晚期下咽鳞癌中的表达与作用机制的-研究

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1、万方数据CATALOGUEChineseabstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1Englishabstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3Symbolillustration．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

2、．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5Introduction⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6Materialandmethod．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8Results．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．：11Dis

3、cussion⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．23Conclusion．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．：16Figuresandtables⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．27Reference．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

4、．．．．．．．．⋯34Review．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯37Acknowledgement⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．47Publications．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48万方数据山东大学硕上学位论文中文摘要背景微

5、小RNA(MicroRNA，miRNA)是由21．23个核苷酸组成的内源性小的非编码RNA，通过抑制基因翻译或使RNA转录子裂解来调控蛋白的表达。越来越多的研究表明miRNA在多种人体肿瘤中异常表达，并且在肿瘤的发生、发展和转移过程中发挥着至关重要的作用。与其他头颈部鳞状细胞癌相比，下咽鳞癌的预后较差，5年生存率约为25％--40％，预后较差的原因有就诊时已达晚期、局部复发及远处转移。尽管手术治疗、放化疗等治疗手段己取得进展，下咽鳞癌患者的生存率并无明显提高。因此，充分了解下咽鳞癌的分子致癌机制对提高疾病的诊断、治疗和预后都有重

6、要意义。目的1、检测miR．214在晚期下咽鳞状细胞癌中的表达。2、探讨miR．214对FaDu细胞侵袭迁移能力及增值克隆的影响。3、初步探讨miR一214影响FaDu细胞侵袭迁移能力的作用机制。方法利用qRT-PCR技术检测30例晚期下咽鳞癌患者肿瘤组织及正常粘膜组织中miR．214的表达；通过转染过表达载体hsa．mir．214上调FaDu细胞中miR．214的表达；采用Transwell侵袭、迁移实验和平板克隆实验，分别检测miR一214表达上调后对FaDu细胞侵袭、迁移及克隆形成能力的影响；利用Westemblot检测上

7、调miR．214表达对TwIST蛋白表达的影响；运用双荧光素酶实验检测TWIST是否为miR．214的直接作用靶基因。结果1、miR．214在晚期下咽鳞癌组织中的表达(O．311±O．206)明显低于下咽正常粘膜组织中的表达(1．620±1．394)，差异有统计学意义(f=5．09，P<0．05)。2、实验组FaDu细胞转染hsa．mir-214后，miR．214的表达较阴性对照组明显上调(t=6．347，P<0．05)。3、Transwell迁移和侵袭实验显示，实验组FaDu细胞迁移能力及侵袭能力均明显低于对照组(t=11．6

8、，P<0．01；t=6．499，P<0．05)。4、平板克隆实验显示，实验组与对照组相比，平均克隆形成数及克隆形成万方数据◆山东大学硕上学位论文率均无明显差异(t=0．592，P>0．05)，miR．214对FaDu细胞增殖能力无明显影响。5、Westernbl