刺五加叶总黄酮的纯化工艺与指纹图谱研究

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1、刺五加叶总黄酮的纯化工艺与指纹图谱研究摘要刺五加系五加科植物，是我国北方地区特产常用药材之一。其根、根茎(五加参)、叶、花及果实均可入药。刺五加的各部位均含有黄酮类化合物，其叶中含量最高。刺五加叶总黄酮具有广泛的生物活性。为了更好地开发利用刺五加叶这一中药资源，本文主要研究了刺五加叶总黄酮的纯化工艺、刺五加叶提取物的液质联用分析以及刺五加叶的高效液相指纹图谱和质谱指纹图谱。论文主要做了以下工作：用大孔树脂法对刺五加叶提取物中的总黄酮进行富集，优化的最佳工艺条件为：使用A型大孔树脂，大孔树脂与刺五加叶

2、比例约为1：0．9，静态吸附时间为6个小时，水洗脱用量为5“倍的树脂柱体积，洗脱剂为60％的乙醇水溶液，洗脱剂用量为5-6倍的树脂柱体积，洗脱速度为20mL／min，将洗脱液浓缩，冷冻干燥后即得刺五加叶总黄酮。其总黄酮的含量达到60％以上，适宜于工业生产，有广阔的应用前景。采用高效液相色谱．电喷雾质谱联用技术对刺五加叶提取物进行液质联用分析，通过对各组分的色谱保留时间、分子量及碎片离子信息进行综合分析，结合详尽的已知相关信息，快速鉴定出芦丁及其同分异构体、金丝桃苷及其同分异构体、槲皮苷等己知化合物及

3、分子量为516道尔顿的目前尚未在刺五加中发现过的化合物。采用半制备液相色谱对分子量为516道尔顿的化合物进行半制备液相色谱分离，成功制各出分子量为516道尔顿的一对同分异构体。通过高分辨质谱仪对这两个化合物的特征质谱行为进行了系统研究，并鉴定了它们的结构。这两种化合物分别为1，5．二咖啡酰奎宁酸和4，5．二咖啡酰奎宁酸。采用高效液相色谱和电喷雾质谱技术测定12批不同来源的刺五加叶提取物，得到了分离度、精密度和重现性均较好的刺五加叶HPLC．UV及ESI．MS指纹图谱，结果表明，各批药材之间相似度均在

4、O．900以上。质谱指纹图谱与液相指纹图谱所得结果一致。这些工作可为刺五加叶药材的质量控制提供参考。关键词：刺五加叶，总黄酮，分离纯化，指纹图谱PurificationoftotalflavonoidsfromAcanthopanaxSenticosusleavesandstudyonitsfingerprintsAbstractTheherbalplantAcanthopanaxSenticosusHarms(Araliaceae)isfoundwidelyspreadinNorthChina．D

5、ifferentpartsoftheplanthavelongbeenused弱ingredientsoffolkmedicinesforthetreatmentofavarietyofhumandiseases．ForAcanthopanaxSenticosusHarms，Flavonoidsoccurinpracticallyallpartsoftheplantandhavethegreatestcontentinleaves．Thetotalflavonoidsobtainedfromthea

6、erialpartofthisplanthaveshownwidebiologicalactivities．Inthearticle，thepurificationprocessoftotalflavonoids，HPLC—ESI·MS“analysesandHPLC-UVandESI-MSfingerprintsanalyseswerestudiedaimingtodevelopandtakebestadvantageofAcanthopanaxSenticosusleaves．Themainwo

7、rksandconclusionsareincludedasfollows：。ThepurificationprocessoftotalflavonoidsinAcanthopanaxSenticosusleaveswithmacroreticularresinwerestudied．Thebesttechnicsofpurificationis瓠follows：thetypeofmacroreticularresinisA．theratiobetweenmacroreticularresinand

8、AcanthopanaxSenticosusleavesisaboutI：0．9，Staticadsorptivetimeis6hours，theamountofwateriS5“timesasmuch瓠theamountofmacroreticularresin．theconsistencyofelutingsolutionis60％ethanolsolution，theamountofelutionis5--6timesasmuchastheamountofmac