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时间:2019-02-02
《abo血型基因与移植肾急性排斥反应的相关性的的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、摘要因。01血型等位基因与Al血型等位基因相比,01血型等位基因缺失261位点的鸟嘌呤(G)。02血型等位基因较为少见,与AI血型等位基因相比较,02血型等位基因在261位点无鸟嘌呤(G)缺失,却存在3个核苷酸差异。ABO血型基因转录翻译表达糖基转移酶,这些糖基转移酶控制ABO血型抗原的生物合成。H转移酶催化糖蛋白前体物质末端半乳糖连接L.岩藻糖,从而产生H抗原。A血型和B血型人群分别表达UDP-N.乙酰.D.半乳糖胺(A转移酶)和UDP.D.半乳糖(B转移酶),所以能够将N.乙酰半乳糖和半乳糖分别添加到H抗原的岩藻糖末端,产生A血型抗原和
2、B血型抗原。AB血型人群同时表达UDP-N.乙酰.D.半乳糖胺(A转移酶)和UDP.D.半乳糖(B转移酶),因此AB型红细胞表面同时表达A血型抗原和B血型抗原。O血型人群既不表达A转移酶也不表达B转移酶,故既不能合成A血型抗原,也不能合成B血型抗原。所以O血型人群红细胞表面仅表达H抗原物质。ABO血型基因位点突变可导致ABO血型基因转录翻译表达氨基酸的模板序列产生差异,使得ABO血型等位基因产物糖基转移酶的结构、活性及功能发生改变,从而产生ABO血型亚型。目前发现的A血型亚型有A1、A2、A3、Aw、Ax、Am&Ael等50余种,B血型亚型
3、包括B3(B301。3帖),Bw,Bel,Bx等40余种,O血型亚型包括01,02等50余种。ABO血型中,最常见的A血型亚型是A1、A2亚型,在欧洲人种中A1亚型约占80%,A2亚型约占20%,A2亚型中1~2%个体血清中可检测到抗A1抗体;最常见的O血型亚型是01、02亚型;目前关于B亚型的研究较少,本研究未对B型进行分型。常规应用血清学方法(正定和反定)鉴定ABO血型,但在鉴定ABO血型亚型及异常表达的个体时受到限制,而检测血型基因可精确分辨ABO血型亚型。目前检测ABO血型基因的常见方法有PCR-限制性内切酶酶切法(PCR-RFLP
4、,polymerasechaillreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism)、引物特异性聚合酶链式反应(PCR-SSP,PCRamplificationwithsequence—specificprimers)和PCR-DNA等检测技术。PCR-SSP检测ABO血型等位基因,是利用ABO血型Ⅱ硕士学位论文等位基因位点特定碱基的差异设计扩增引物序列,设计合成的引物特异扩增目的基因。综上所述,随着分子生物学技术的不断发展,人类在ABO血型抗原、抗体、糖基转移酶、ABO血型基因各个层次的研究不断
5、深入,所以我们认为有必要重新审视ABO血型这一经典问题在移植排斥中的意义,明确供受者ABO血型基因错配是否可导致移植术后排斥反应。本研究采用引物特异性聚合酶链式反应(PCR-SSP)技术检测87例肾移植受者及其对应48例供者的ABO血型基因,并探讨供受者ABO血型基因与移植肾急性排斥反应的相关性。本论文可分为以下两章。第一章PCR-SSP方法检测ABO血型基因的可行性分析目的:探讨应用引物特异性聚合酶链式反应(PCR-SSP)技术检测同种异体肾移植供受者ABO血型基因的可行性。方法:采用PCR-SSP技术检测2009年5月至2010年2月在
6、我院行同种异体肾移植手术的87例肾移植受者及其对应的48例供者的ABO(Al、A2、B、01、02)血型基因。同时采用血清学方法确定其相应的血清学表型。结果:应用PCR-SSP方法在本组135个病例中检测到13种ABO血型基因型,其中A1A1血型基因型2例、A101血型基因型14例、A102血型基因型5例、9201血型基因型1例、A202血型基因型l例、BB血型基因型5例、B01血型基因型14例、B02血型基因型7例、0101血型基因型22例、0102血型基因型41例、0202血型基因型9例、A1B血型基因型12例、A2B血型基因型2例,未
7、检测到A1As、A2A2血型基因型。血清学方法和PCR-SSP方法确定的ABO血型表型中,有A型23例,B型26例,O型72例,AB型14例。引物特异性聚合酶链式反应(PCR-SSP)方法和血清学方法确定的ABO血型表型完全一致。结论:本研究应用PCR-SSP方法和血清学方法所定ABO血型表型完全相符,提示本研究ABO血型等位基因引物设计合成可靠,引物扩增条件稳定。因为II!摘要PCR-SSP方法检测ABO血型基因与H】-一A检测共享技术平台,且具有简捷、易操作、结果直观等优点,所以检测供受者阳二A时同步检测供受者ABO血型基因具有很强的可
8、行性。第二章ABO血型基因与移植肾急性排斥反应的关系目的:探讨供受者ABO血型基因与受者移植肾急性排斥反应(mQ的发生、治疗及转归的关系。方法:PCR-SSP方法检测2009年5
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