新型真菌源激活蛋白的分离纯化与生物功能的研究

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1、独创性声明本人声明，所呈交的学位(毕业)论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。学位(毕业)论文作者亲毫签名勿7枥日期．2008年占月／i‘wt论文使用授权的说明本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位(毕业)论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全

2、部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密，在年后解密可适用本授权书。口不保密，本论文属于不保密。口学位(毕业)论文作者亲笔签名别歹够日期．√以¨／)懒牒撇：关寸缗眺如“。，夕福建农林大学2008届硕士学位论文摘要激活蛋白(ActivatorProtein)是一类源于真菌的新型蛋白激发子，前期研究发现该蛋白激发子具有诱导植物抗性和促进植物生长的作用。激活蛋白是一类新型的生物农药，具有广谱高效、多功能和无残留的特点。本文研究了病原真菌的培养与激活蛋白的纯化、对植物生长及其生理活性的影响。测定了不同浓度激活蛋白处理对作物生

3、理特性的影响及其经激活蛋白处理后，植物的纤维素酶活性，过氧化氢和脯氨酸的含量，从而研究其作用机理，为进一步的商业化生产起到一定的作用。1、病原真菌的培养与激活蛋白的纯化本实验室保存的稻瘟菌在液体PDA培养基中振荡培养后，抽提蛋白，利用硫酸铵沉淀法将粗蛋白沉淀，后利用酒精沉淀蛋白一次，利用FPLC高效蛋白纯化系统进行蛋白纯化，通过离子交换层析、疏水层析和分子筛连用的方法获得了纯化的该蛋白。实验证明，用pH7．5的MES缓冲液条件下获得的初步纯化的该蛋白。将上述蛋白样品过分子筛后获得的单峰为纯化蛋白。利用固相梯度凝胶电泳获得该蛋白的等电点，

4、实验证明该蛋白的等电点为4．314±0．035，是一种酸性蛋白。2、为探讨真菌源激活蛋白在促进作物生长方面的效果，研究了不同浓度激活蛋白处理对多种作物的影响。试验结果表明，用2’3llg／mL的新型激活蛋白浸泡棉种6h，能显著提高种子的发芽势和发芽率。番茄和丝瓜种子分别用l腿／ml的蛋白浸种6h，能显著提高种子的发芽率。黄瓜种子用500倍和1000倍液都能显著提高种子的发芽率。为探讨真菌源激活蛋白对大田作物的效果，研究了不同浓度激活蛋白处理对油桃、大蒜、冬枣的影响。结果表明，用1000-1500倍液在大田中就可有良好的效果。3、为探讨真

5、菌源激活蛋白在促进植物生长和增产方面的作用机理，研究了不同浓度激活蛋白处理对大豆幼苗生理特性的影响。结果表明，经1、2、5ug／mL激活蛋白处理后第7d，大豆幼苗根系活力比对照分别增加了44．2％、54．5％和19．8％，硝酸还原酶活性比对照分别增加了61．33％、138．37％和53．2％。4、研究表明，稻瘟菌激活蛋白可明显提高丝瓜、番茄等发芽率，促进种子发芽整齐，同时对促进植物幼苗生长、健壮也有明显的作用。经激活蛋白处理后，植物的纤维素酶活性增强，过氧化氢和脯氨酸的含量提高，这些酶和活性物质在促进植物生长抗逆方面能发挥重要作用。关键

6、词：稻瘟菌激活蛋白分离纯化生物活性作用机制福建农林大学2008届硕士学位论文AbstractAc：tivatorProteinisakindofnewlydiscoveredproteinaceouselicitorisolatedfromfungi．Previouslystudieshavedemonstratedthatitisnotonlyabletoincreaseplantgrowthbutalsocouldinduceresistancetopathogen．Itisonenewtypeof“green’’biologica

7、lfungicide，withhighefficiency，wideresistancespectrumandnoresidueintheenvironment．ThisarticlestudiesthecultureoftheMagnaportheandthepurificationoftheproteinandeffectoftheActivatorProteinfromMagnaporthegriseaonPlantGrowthandPhysiologicalActivities．Theinfluenceandmechanismo

8、factivatorproteinwithdifferentconcentrationonphysiologicalcharacteristicsofSoybeanwasstudied．Itshowedth